摘要:
目的 本文重点研究胎羊体外循环影响心肌microRNAs的表达情况,探索microRNAs导致胎羊体外循环(CPB)后胎心功能失调的可能机制.方法 孕120~140 d母羊6只,其中两只孕羊有双胎,共孕8只胎羊,随机分为对照组(n=4)和胎羊CPB组(n=4).对照组胎羊开胸,不建立CPB.CPB组建立胎羊心脏转流模型,转流30 min.分别于转流前和转流30 min结束后测胎羊心率和血肌钙蛋白Ⅰ(TnⅠ)的变化,B超检测左、右心室Tei指数.取胎羊心尖部心肌组织,采用microRNA芯片和荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术检测两组心肌组织的microRNAs的表达水平.使用生物信息学方法预测microRNAs的靶基因,并进行蛋白印迹实验(WB)验证.结果 两组胎羊心率变化无统计学差异(P>0.05).CPB组胎羊左、右心室Tei指数、血TnⅠ含量均显著大于对照组(P<0.05).两组的microRNAs表达谱显著不同,有19个microRNAs显著差异性表达,其中11个microRNAs(miR-125b*,-151,-127,-144*,-141,-199b,-224,-301a,-30e*,-374a和-424*)在组织中被上调,而8个microRNAs(miR-99a,-151*,-21,-223,-320,-129,let-7a和-7e)被下调.肌浆内质网Ca2+转运蛋白2(SERCA2)是miR-151的靶基因,并在CPB组的心肌组织中被明显下调.结论 MicroRNAs的差异性表达与胎羊体外循环后胎心功能失调密切相关,可能是通过miR-151/SERCA2通路来实现.