整合素连接激酶过表达促进猪骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

• 作者: 原晖华 徐标 牡丹 顾蓉
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 5-氮杂胞苷 整合素连接激酶 骨髓间充质干细胞 心肌样细胞
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 875-881
• 分类号: R363
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨提高骨髓间充质干细胞(BMMSC)向心肌样细胞分化的方法,观察整合素连接激酶(ILK)过表达促进BMMSC向心肌样细胞分化的效果.方法 用包含人野生型ILK cDNA和绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒载体(Ad-GFP-ILK)转染体外培养的猪BMMSC,诱导其在BMMSC中高表达,并用高浓度(50 μmol/L)的5-氮杂胞苷(5-AZA)刺激诱导BMMSC向心肌样细胞分化.实验分为空白对照组(N组)、Ad-GFP转染组(Ad组)、5-AZA诱导组(5-AZA组)、Ad-GFP-ILK转染组(ILK组).用噻唑蓝(MTF)法检测各组细胞活力;培养至2周、4周时采用免疫细胞化学染色检测心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)和α辅肌动蛋白(α-actinin)表达;4周时提取蛋白,Werstem blot检测cTnⅠ、缝隙连接蛋白43 (CX-43)、Caspase-3和ILK的表达.结果 MTT检测结果显示Ad组、5-AZA组比N组、ILK组细胞活力明显减弱(P＜0.05);但Ad组、5-AZA组之间,N组、ILK组之间比较均无统计学差异(P＞0.05).细胞培养至2周时,免疫细胞化学染色显示,5-AZA组、ILK组开始表达心肌特异性标记物cTnⅠ和α-actinin,而N组、Ad组均没有明显阳性表达.Western blot结果显示ILK蛋白在ILK组表达较其他组明显升高(P＜0.05).与N组、Ad组比较,5-AZA组、ILK组cTnⅠ表达明显升高(P＜0.05);而5-AZA组、ILK组之间,N组、Ad组之间则没有差异(P＞0.05).CX-43在4组间的表达趋势与cTnⅠ相同.Caspase-3表达在Ad组、5-AZA组较其他组明显升高(P＜0.05).结论 ILK过表达能促进BMMSC向心肌样细胞分化,其分化效率和较高浓度的5-AZA体外刺激无差异.ILK过表达对细胞增殖活力无影响,且有一定的抗凋亡作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐标	南京大学医学院附属鼓楼医院心内科	117	467	10.0	15.0
2	牡丹	南京大学医学院附属鼓楼医院影像科	18	67	5.0	7.0
3	顾蓉	南京大学医学院附属鼓楼医院心内科	13	28	3.0	4.0
4	原晖华	南京医科大学附属江宁医院心内科	1	1	1.0	1.0