骨髓间充质干细胞来源的外泌体促进牙周再生的体外研究

• 作者: 刘世宇 张红梅 朱斌 李楠 田自锋
• 来源期刊: 中国实用口腔科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人骨髓间充质干细胞 人牙周膜干细胞 外泌体 成骨分化 牙周再生
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 口腔颌面部组织再生专栏
• 页码范围: 709-713
• 页数: 5页
• 分类号: R78
• 字数: 3652字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7504/kq.2016.12.002

摘要

目的 研究人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMMSCs)分泌的外泌体(exosome)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)增殖和分化功能的影响,为进一步明确hBMMSCs促进牙周组织再生的机制提供实验基础和证据.方法 分别用酶消化法和离心法培养hPDLSCs和hBMMSCs,并用流式细胞术检测其间充质表面标志物.收集培养的第3代hBMMSCs上清液,利用试剂盒提取exosome,电镜下观察其结构,Western Bolt法检测其CD63表达水平.用hBMMSCs分泌的exosome处理hPDLSCs设为实验组,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测hPDLSCs的增殖情况,克隆形成率检测多克隆形成能力,成骨诱导后碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色并定量,同时实时荧光定量PCR(qPCR)检测成骨相关基因表达.结果 流式细胞术检测,hPDLSCs阳性表达CD29、CD44、CD90、CD146和Stro-1,hBMMSCs阳性表达CD29、CD44、CD90和CD106,两者均阴性表达CD14、CD34和CD45.hBMMSCs分泌的exosome电镜下呈小球状,Western Bolt法检测其强表达CD63.实验组hPDLSCs经MTT法检测其增殖速率和克隆形成能力显著高于对照组(P＜0.05).实验组hPDLSCs成骨诱导后ALP染色、茜素红染色定量表达显著强于对照组(P＜0.05).qPCR检测成骨基因Runx2、OCN、ALP、BSP和Col-Ⅰ的表达,实验组显著高于对照组(P＜0.05).结论 hBMMSCs分泌的exosome可促进牙周膜干细胞的体外增殖和成骨分化能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田自锋	西藏军区总医院口腔科	15	28	3.0	5.0
2	张红梅	第四军医大学唐都医院烧伤整形科	55	281	9.0	13.0
3	李楠	西藏军区总医院口腔科	7	34	4.0	5.0
4	刘世宇	军事口腔医学国家重点实验室第四军医大学组织工程研发中心	3	14	2.0	3.0
5	朱斌	西藏军区总医院口腔科	2	11	2.0	2.0