小鼠骨髓间充质干细胞外泌体的分离与鉴定

• 作者: 严祥 卫小凤 李莹 王如岭 王黎明 白仲添 齐阔
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 间充质干细胞 外泌体 细胞分离 鉴定
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 649-653
• 页数: 5页
• 分类号: R331
• 字数: 2457字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨骨髓间充质干细胞的外泌体的分离与鉴定方法.方法 通过全骨髓贴壁法培养间充质干细胞;用新兴试剂法收集外泌体,采用电镜、粒径检测、流式细胞仪和Western blot鉴定外泌体.结果 第三代骨髓间充质干细胞表面CD45呈阴性表达,CD73和CD105呈阳性表达;骨髓间充质干细胞外泌体呈圆形或椭圆形,大小不均匀,直径30~100 nm,有完整的膜结构;粒径检测显示颗粒直径主峰为61.25 nm,直径为20~200 nm的颗粒占72.4%;外泌体CD63和CD81呈阳性表达;细胞培养上清液中可检测到外泌体CD9和CD63的蛋白表达.结论 在培养间充质干细胞的培养基中可以收集到外泌体,可以通过透射电镜、粒径检测、流式细胞仪和Western blot 对骨髓间充质干细胞的外泌体进行鉴定.