脂多糖刺激的骨髓间充质干细胞来源外泌体 改善小鼠心肌梗死后炎症和纤维化

• 作者: 余细勇 傅小媚 李松沛 林潮金 王萍 秦爱萍 范景皓 邓赛 邹明辉 霍然
• 来源期刊: 中国临床药理学与治疗学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 外泌体 脂多糖 心肌梗死 纤维化 炎症
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 841-851
• 页数: 11页
• 分类号: R542.2|R965.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.12092/j.issn.1009-2501.2019.08.001

摘要

目的:探讨脂多糖(LPS)刺激下的骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的外泌体对小鼠心肌梗死(MI)后的治疗作用.方法:流式成像细胞分析术鉴定BMSCs的表面标记分子,油红O和茜素红染色于镜下观察成骨成脂分化能力.LPS刺激BMSCs 48 h,提取细胞培养上清外泌体,用透射电镜和粒度分析仪捕捉其形态和粒径大小,流式细胞术和Western blot检测特异性表面标记分子及蛋白表达.建构小鼠MI模型并予以外泌体心脏局部注射,利用心脏超声、组织病理切片和PCR评价治疗结果.结果:分离的BMSCs表达CD29、CD44、CD90、CD73、CD105,未表达HLA-DR、CD14、CD34、CD45,具有成骨成脂分化能力.Western blot检测到外泌体表达Alix、HSP70、Flo-tillin-1蛋白,流式成像仪检测到外泌体膜表面的CD63、CD9和CD81标记分子,粒径众数为69.2 nm.LPS刺激下BMSCs产生的外泌体注射小鼠心脏后,与PBS注射的MI对照组比较,心脏超声评价7天和28天的射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)都显著增大(P<0.01,P<0.05),在第28天的舒张末期容积(LVEDV)和收缩末期容积(LVESV)均显著减小(P<0.05),Masson染色显示纤维化面积减小(P<0.01),PCR检测到炎症因子IL-6、IL-1β、转化生长因子β(TGF-β)和趋附因子CCL2表达减少,CX3 CL1表达增多,术后第14天最为明显.结论:LPS刺激的BMSCs来源外泌体可以改善小鼠MI后心肌收缩功能和纤维化,降低炎症因子表达量.