缺氧环境下shRNA下调MTDH基因对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响

• 作者: 刘兆喆 徐龙 杜成 苏冰 谢晓冬 韩涛
• 来源期刊: 临床误诊误治
• 学科: 医学
• 关键词: 转移黏附基因 乳腺肿瘤 缺氧诱导因子1,α亚基 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 107-113
• 页数: 7页
• 分类号: R737.9
• 字数: 5055字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-3429.2016.01.038

摘要

目的 探讨缺氧环境下MTDH表达下调对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响.方法 ①利用二氯化钴模拟缺氧环境,采用RT-PCR及Western blot法检测HIF-1α及MTDH基因在缺氧环境下表达水平的改变;②缺氧环境下将加入MTDH-shRNA转染质粒的MCF-7细胞(缺氧MTDH-shRNA组)、control-shRNA转染质粒的MCF-7细胞(缺氧Control-shRNA组)及仅予单纯二氯化钴缺氧处理的MCF-7细胞(单纯缺氧组)分别转染,24 h后观察转染率,再应用RT-PCR及Western blot法检测MTDH基因在mRNA和蛋白水平上的变化;③MTT实验检测下调MTDH基因表达对单纯缺氧组、缺氧Control-shRNA组和缺氧MTDH-shRNA组MCF-7细胞增殖的影响,并采用Hoechst33258染色及流式细胞术检测3组细胞的凋亡情况;④采用RT-PCR及Western blot法观察下调MTDH基因对单纯缺氧组、缺氧Control-shRNA组和缺氧MTDH-shRNA组HIF-1α表达的影响.结果 ①缺氧环境下MCF-7细胞HIF-1α基因表达无变化,HIF-1α蛋白表达在一定范围内随缺氧时间延长而升高(P＜0.05),MTDH基因及蛋白表达随缺氧时间延长均逐渐升高(P＜0.05);②MCF-7细胞转染率约60％,与单纯缺氧组和缺氧Control-shRNA组相比,缺氧MTDH-shRNA组MTDH基因及蛋白表达均减低(P＜0.05);③下调MTDH基因表达后,与单纯缺氧组及缺氧Control-shRNA组比较,缺氧MTDH-shRNA组MCF-7细胞增殖抑制率减弱(P＜0.05),凋亡细胞数量增加(P＜0.05);④下调MTDH基因表达后,与单纯缺氧组及缺氧Control-shRNA组比较,缺氧MTDH-shRNA组HIF-1α蛋白表达减低(P＜0.05).结论 缺氧环境下,下调MTDH基因可调控MCF-7细胞HIF-1α蛋白表达,同时降低MCF-7细胞增殖能力,并促进其凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢晓冬	沈阳军区总医院全军肿瘤诊治中心肿瘤科	165	1097	15.0	25.0
2	韩涛	沈阳军区总医院全军肿瘤诊治中心肿瘤科	66	448	12.0	17.0
3	刘兆喆	沈阳军区总医院全军肿瘤诊治中心肿瘤科	62	300	10.0	12.0
4	杜成	沈阳军区总医院全军肿瘤诊治中心肿瘤科	13	63	5.0	7.0
5	徐龙	沈阳军区总医院全军肿瘤诊治中心肿瘤科	14	93	6.0	9.0
6	苏冰	沈阳军区总医院全军肿瘤诊治中心肿瘤科	1	4	1.0	1.0