碱性条件下苏云金芽胞杆菌基础代谢分析

• 作者: 宋福平 张杰 彭琦 李杰 考桂伟 邱丽丽
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 苏云金芽胞杆菌 耐碱适应 基础代谢 苹果酸
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 天然产物的合成调控与创新高产
• 页码范围: 485-495
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20150613

摘要

[目的]探索苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)形成转录差异的碱性条件,明确B.thuringiensis在该条件下的基础代谢途径变化.[方法]采用半定量RT-PCR技术及实时荧光定量PCR技术,确定碱刺激下参考基因pspA存在表达差异的碱性处理条件.在该条件下提取RNA进行Agilent定制B.thuringiensis表达谱芯片杂交,对芯片数据进行差异表达分析、GO富集分析及生物途径富集分析等.[结果]通过检测pspA表达变化,将对数生长中期的菌体加入终浓度为28 mmol/L的NaOH并诱导培养10min,作为B.thuringiensis响应碱刺激的研究条件.富集分析表明碳代谢、脂肪酸合成代谢、氨基酸合成代谢途径变化明显.细胞糖酵解途径至少19个酶促基因上调表达,三羧酸循环中催化α-酮戊二酸转化为苹果酸的大部分酶蛋白编码基因上调2倍以上.[结论]本研究发现在碱性条件下B.thuringiensis基础代谢明显增强,细胞可能通过大量合成酸性物质如乳酸、苹果酸等来提高细胞对于碱性环境的适应能力.