FAM20C在体外培养人牙髓细胞中的表达及成牙本质向分化诱导对其表达的影响

• 作者: 徐琼 易柏成 莫泽欢
• 来源期刊: 中华口腔医学研究杂志（电子版）
• 关键词: 牙髓 细胞培养 体外 FAM20C 成牙本质向分化
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 315-321
• 页数: 7页
• 字数: 4822字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-1366.2016.05.003

摘要

目的：研究人牙髓细胞（hDPC）体外培养传代过程中FAM20C的表达模式，及对hDPC成牙本质向分化诱导后FAM20C的表达变化。方法蛋白免疫印迹法（Western blot）检测第1代至第7代（P1~P7）hDPC中FAM20C蛋白的表达量；结果采用独立样本t检验；对P3代hDPC进行成牙本质分化诱导7和14 d后，反转录聚合酶链反应与Western blot检测FAM20C的mRNA和蛋白水平变化。牙本质涎磷蛋白（DSPP）、牙本质基质蛋白1（DMP1）表达变化，FAM20C的mRNA以及蛋白表达变化采用单因素方差分析。免疫荧光法检测FAM20C在hDPC中的分布。结果体外培养的hDPC中可检测到FAM20C表达，表达量随细胞传代先增加后减少（tP2=-10.177，PP2=0.001；tP3=-18.242，PP3＜0.001；tP4=-19.143，PP4＜0.001；tP5=-7.452，PP5=0.002；tP6=1.357，PP6=0.246；tP7=1.099，PP7=0.334）；成牙本质向分化诱导7和14 d后，FAM20C的mRNA和蛋白表达量高于未诱导组细胞（FFAM20C mRNA=86.252， PFAM20C mRNA，7 d＜0.001，PFAM20C mRNA，14 d＜0.001；FFAM20C蛋白=85.569，PFAM20C蛋白，7 d=0.002，PFAM20C蛋白，14 d＜0.001）。免疫荧光结果显示，成牙本质诱导前FAM20C蛋白表达于细胞核，诱导后主要表达于细胞质，诱导14 d FAM20C在细胞质中表达量高于诱导7 d。结论 hDPC中表达FAM20C，成牙本质向分化诱导上调其表达水平，诱导后在细胞质中表达较高，提示FAM20C与hDPC的成牙本质分化相关。