适于番茄叶片蛋白质组分析的双向电泳优化体系的建立

• 作者: 余庆辉 唐亚萍 帕提古丽 李宁 杨涛 杨生保 王娟 王强 王柏柯
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 番茄叶片 蛋白质组 双向电泳(2-DE)
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 页码范围: 610-616
• 页数: 7页
• 分类号: S188|S641.2
• 字数: 6167字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2016.04.004

摘要

[目的]建立适于番茄叶片蛋白质组分析的双向电泳(2-DE)技术,为开展番茄蛋白质组学研究奠定技术基础.[方法]对番茄叶片蛋白质提取方法、蛋白质裂解液、上样量、胶条pH范围等关键步骤进行优化.[结果]采用三氯乙酸／丙酮法提取番茄叶片总蛋白质,含有7 moL/L尿素,2 mol/L硫脲,4％ CHAPS,30 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)裂解缓冲液,上样量为100 mg,以pH 4 ～7、18 cm的IPG胶条在12％ SDS-PAGE凝胶浓度下进行双向电泳,得到了蛋白点均匀分布、低峰度蛋白点较为清晰,蛋白点数目多且分辨率高的2-DE图谱.[结论]建立了一套适于番茄叶片蛋白质分析的双向电泳技术体系,为下一步在蛋白组学水平上分析番茄逆境胁迫等相关蛋白提供了技术支持.