小鼠冷冻胚胎、精子常见病原菌快速检测方法的建立

• 作者: 刘丽均 强苏静 徐伟超 徐平 芮荣 葛蓉 顾剑洁
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 肺炎克雷伯氏菌 乙型溶血性链球菌 PCR检测
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 69-75
• 页数: 7页
• 分类号: R-332
• 字数: 4191字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2016.09.013

摘要

目的：建立实验动物冷冻资源（胚胎、精子等）常见病原菌的微量、快速监测方法。方法以实验动物三个常见病原菌（金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌和乙型溶血性链球菌）为研究对象，分别提取三个阳性菌株的DNA，通过引物设计和相应PCR条件的优化，建立三种阳性菌株的PCR检测方法。然后提取冷冻资源（胚胎、精子等）中的DNA，按照三个阳性菌的PCR条件进行检测，并将一部分样品DNA用荧光定量PCR方法进行检测。结果①成功建立三个阳性菌株的PCR检测方法。三种病原菌的最低检测浓度，金黄色葡萄球菌为4?19×10－5 ng／μL，肺炎克雷伯氏菌为1?98×10－5 ng／μL，乙型溶血性链球菌为1?07×10－3 ng／μL．②通过普通PCR和荧光定量PCR方法均未检测出样品中三种阳性菌的存在。结论建立了小鼠冷冻胚胎、精子常见病原菌微量、快速检测方法。