幼年特发性关节炎患者外周血单个核细胞中miR-21 miR-19a与JAK/STAT通路的表达与意义

• 作者: 曾华松 李洪伟 陈挚
• 来源期刊: 中华风湿病学杂志
• 关键词: 关节炎,幼年型类风湿 miRNA JAK/STAT 信号通路
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 459-464
• 页数: 6页
• 字数: 4057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-7480.2016.07.006

摘要

目的 探讨miR-21、miR-19a在幼年特发性关节炎(JIA)发病中的作用及与JAK/STAT通路关键靶基因(SOCS3、STAT3)的相互关系.方法 收集广州市妇女儿童医疗中心确诊的33例活动期JIA患儿(病例组,其中全身型组20例,关节型组13例);健康对照组20名.Ficoll法分离PBMCs,提取和纯化miRNA,反转录为cDNA;通过Targetscan和RNA22共同预测靶基因,设计引物,miR-21、miR-19a以U6为内参,STAT3、SOCS3、IL-6、TNF-α mRNA以β肌动蛋白为内参,应用荧光定量PCR分别检测其组间表达,计算标准化后的2-ΔΔCT值表示miRNA的相对表达含量,非参数检验统计2组数据2-ΔΔCT的差异.结果 病例组与对照组miR-21表达水平低于对照组,差异有统计学意义(Z=2.11,P=0.036);其中,对照组miR-21相对表达量为全身型组的7.7(7～8.5)倍、关节型的6.49(6～7)倍,差异有统计学意义(Z=2.615,P=0.014 9;Z=2.654,P=0.029 1);全身型组与关节型组间miR-21表达水平差异无统计学意义(Z=0.221,P=0.827 1).病例组与对照组miR-19a表达水平低于对照组,差异有统计学意义(Z=2.41,P=0.014);其中,对照组miR-19a相对表达量为全身型组的11.3(10～12.1)倍、关节型的12.2(12～13.5)倍,差异有统计学意义(Z=2.334,P=0.0157;Z=2.414,P=0.0266);全身型组与关节型组间miR-19a表达水平差异无统计学意义(Z=0.538,P=0.596).软件预测显示与JAK/STAT通路相关的STAT3,SOCS3、TNF-α分别为miR-21、miR-19a的靶基因.荧光定量PCR示病例组(全身型组、关节型组)STAT3 [6.24 (2.81,7.54)与3.97(1.81,5.75),P=0.001,0.008]、TNF-α[3.03(2.07,3.80)与3.42(2.46,4.68),P=0.002,0.001]、IL-6[4.75(3.59,6.32)与3.52 (2.31,7.51),P=0.006,0.036]、SOCS3[2.54 (1.77,4.00)与3.57(1.95,3.83),P=0.003,0.001]mRNA相对表达量较对照组高;病例组(全身型组、关节型组)STAT3 mRNA相对表达量与miR-21呈负相关(r=-0.585 4,P=0.006 7;r=--0.613 4,P=0.044 7),病例组(全身型组、关节型组)TNF-α、SOCS3 mRNA相对表达量与miR-19a呈现负相关,全身型组TNF-α(r=-0.664 2,P=0.001 4)、SOCS3(r=-0.790 3,P=0.000 1).关节型组TNF-α(r=-0.626 1,P＝0.039 3)、SOCS3(r=-0.882 4,P=0.003).结论 JIA患者与健康人相比,PBMCs中miR-21、miR-19a表达水平的降低,其靶基因STAT3、SOCS3、TNF-α mRNA表达升高,提示JAK/STAT通路激活,miR-21、miR-19a水平降低与该通路的激活有关.