生物钟基因Per1对人口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、细胞周期和体内成瘤的影响及机理

• 作者: 付小娟 李晗雪 杨凯 赵钦 陈丹
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生物钟 Per1 细胞周期 基因 口腔癌
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 255-261
• 页数: 7页
• 分类号: R 739.8
• 字数: 6257字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7518/hxkq.2016.03.008

摘要

目的：探讨生物钟基因Per1对细胞周期相关基因的调控作用，以及对人口腔鳞状细胞癌细胞SCC15增殖、凋亡、细胞周期和体内成瘤的影响。方法构建3组针对Per1?RNA的短发夹RNA（shRNA）慢病毒重组质粒，转染SCC15细胞，用蛋白质印迹法（Western?blot）及实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测筛选RNA干扰作用最强组为实验组，对照组（Control-shRNA）为对任何基因均无干扰效应的shRNA序列的质粒，空白组为未做任何处理的SCC15细胞。用qRT-PCR检测各组细胞中细胞周期相关基因Per1、p53、Cyclin?D1、Cyclin?E、Cyclin?A2、Cyclin?B1、CDK1、CDK2、CDK4、CDK6、p16、p21、Wee1、cdc25、E2F、Rb1?mRNA的表达；用流式细胞仪检测各组细胞增殖、凋亡和细胞周期分布；将实验组和空白组细胞分别接种于裸鼠背部皮下，观察成瘤情况。结果成功构建了3组Per1-shRNA慢病毒质粒，通过qRT-PCR和Western?blot证明Per1-shRNA-Ⅰ组沉默效果最佳，作为实验组。Per1-shRNA-Ⅰ组中Cyclin?D1、Cyclin?E、Cyclin?B1、CDK1和Wee1?mRNA的表达水平高于Control-shRNA组和SCC15组（P<0.05），p53、Cyclin?A2、p16、p21和cdc25?mRNA的表达水平降低（P<0.05）；Control-shRNA组和SCC15组中各基因mRNA的表达水平无差异（P>0.05）。CDK2、CDK4、CDK6、E2F和Rb1?mRNA的表达水平在3组中均无统计学差异（P>0.05）。Per1-shRNA-Ⅰ组中细胞增殖指数高于Control-shRNA组和SCC15组（P<0.05），凋亡指数降低（P<0.05），S期的细胞数降低（P<0.05），G2/M期的细胞数增加（P<0.05）。Control-shRNA组和SCC15组细胞的增殖指数和凋亡指数无统计学差异（P>0.05）。Per1-shRNA-Ⅰ组细胞体内成瘤能力显著增强（P<0.05）。结论生物钟基因Perl是重要的抑癌基因，Perl能调控下游众多的细胞周期基因，其表达变化影响细胞周期进程、增殖和凋亡的平衡失调及体内成瘤能力，对Per1深入研究有可能进一步明确癌症的发生发展机制，为癌症的治疗提供新的有效分子靶点。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈丹	重庆医科大学附属第一医院口腔颌面外科	54	271	10.0	15.0
2	杨凯	重庆医科大学附属第一医院口腔颌面外科	137	678	13.0	19.0
3	赵钦	重庆医科大学附属第一医院口腔颌面外科	5	16	3.0	4.0
4	付小娟	重庆医科大学附属第一医院口腔颌面外科	2	12	2.0	2.0
5	李晗雪	重庆医科大学附属第一医院口腔颌面外科	2	12	2.0	2.0