害嗜鳞螨过敏原Lep d2的原核表达与纯化

• 作者: 何颖 关志澳 邹泽红 陶爱林
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Lep d 2 害嗜鳞螨 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 691-694,698
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

目的 构建害嗜鳞螨(Lepidoglyphus destructor)过敏原Lepd2的原核表达系统,获得Lepd 2的重组纯化蛋白.方法 通过双酶切pUC-Lep 2质粒,获取基因Lepd2,并结合高保真PCR获取去信号肽基因rLep d 2,连接载体pET44a并转入表达菌株Rosetta;利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)和蛋白免疫印迹法分别进行诱导表达与鉴定;用盐酸胍溶解包涵体并进行透析复性;使用Strep Ⅱ亲和填料来纯化目的蛋白.结果 构建了Rosetta-rLep d 2的原核表达体系;rLep d 2蛋白在菌体内主要表达形式为包涵体,通过透析复性和亲和纯化获得了高纯度的rLepd2蛋白.结论 获得的重组rLep d 2蛋白可为下一步评价其过敏原性提供研究材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶爱林		9	17	2.0	4.0