淋病奈瑟菌核酸检测试剂盒国家参考品的制备

• 作者: 刘茹凤 卢旭 叶强 唐静 李红 王春娥 石继春 陈琼 陈翠萍
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 淋病奈瑟菌 核酸 试剂盒 参考品
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-25
• 页数: 5页
• 分类号: R392-33
• 字数: 3467字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2016.05.004

摘要

目的：制备淋病奈瑟菌( Neisseria gonorrhoeae,NG)核酸检测试剂盒国家参考品。方法分别将10株NG和10株非NG参考菌株在各自适宜的培养基和温度下培养,收获新鲜无污染培养物,用比浊法和显微计数法将不同的培养物制备成10份NG菌悬液阳性参考品、5份精密性参考品和10份非NG菌悬液阴性参考品以及最低检出限参考品,然后利用5种不同来源的NG核酸检测试剂盒验证各种参考品,并考察参考品在不同处理条件下的稳定性。结果每株菌在各自适宜的培养基和温度下培养后,均生长良好,无杂菌污染。经5种试剂盒验证检测,10份阳性参考品的检测结果均为阳性,10份阴性参考品的检测结果均为阴性,精密性参考品检测结果为Ct值的CV均小于5.0%；5种试剂盒的最低检出限均能达到1000/mL,其中试剂盒B和E的最低检出限达100/mL。参考品在2~8℃放置7 d、37℃放置3 d的热稳定性及反复冻融5次以内的稳定性良好。结论制备的NG核酸检测试剂盒国家参考品的准确性、特异性及精密性均符合要求,可用于NG核酸检测试剂盒的质量评价。