单极纺锤体蛋白激酶1(Mps1)对蛋白酶体α7亚基(PSMA7)蛋白稳定性的影响

• 作者: 何湘 张萍萍 曹源 王鹏皓 胡成进 钟辉 魏从文
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 单极纺锤体蛋白激酶1(Mps1) 蛋白酶体α7胡亚基(PSMA7) 蛋白酶体 稳定性
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 392-395
• 页数: 4页
• 分类号: Q556.9
• 字数: 2877字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2016.05.008

摘要

目的 研究单极纺锤体蛋白激酶1(Mps1)对蛋白酶体α7亚基(PSMA7)蛋白稳定性的影响.方法 通过重组PCR方法将663位天冬氨酸突变为丙氨酸,构建Mps1激酶活性缺失的突变体(pcDNA3-Flag-Mps1 KD),并通过免疫印迹实验检测其是否能成功表达.采用免疫印迹实验检测Mps1及Mps1KD对PSMA7蛋白稳定性的影响;通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测Mps1及Mps1 KD对PSMA7 RNA表达水平的影响.结果 免疫印迹结果证实构建的突变质粒Mps1 KD能正确表达且野生型Mps1可明显增强PSMA7稳定性,而Mps 1KD则不能;加入Mps1激酶活性抑制剂后,降低PSMA7稳定性;RT-PCR检测结果发现Mps1及Mps1 KD对PSMA7RNA表达水平无影响.结论 成功构建了Mps1激酶活性缺失突变体真核表达质粒pcDNA3-Flag-Mps1 KD,并在293T细胞中得到了表达;研究还发现Mps1通过其激酶活性可增强PSMA7蛋白稳定性,但对其RNA表达水平无影响,为进一步研究Mps1对蛋白酶体功能影响及对肿瘤发生发展奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟辉	军事医学科学院生物工程研究所	47	246	8.0	14.0
2	何湘	军事医学科学院生物工程研究所	13	48	4.0	6.0
3	魏从文	军事医学科学院生物工程研究所	9	12	2.0	2.0
4	曹源	济南军区总医院实验诊断科	17	29	3.0	4.0
5	胡成进		3	4	2.0	2.0
6	张萍萍		3	6	1.0	2.0
15	王鹏皓	军事医学科学院生物工程研究所	1	0	0.0	0.0