耐甲氧西林金黄色葡萄球菌细胞膜20肽重组蛋白的表达和鉴定

• 作者: 周敬敬 崔凡 李良怿
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 重组蛋白 质粒 IgA肾病模型 动物实验
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1693-1695,1701
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61
• 语种: 中文

摘要

目的 利用基因重组技术构建原核质粒表达耐甲氧西林金黄色葡萄球菌细胞膜20肽重组蛋白(SA0587),为进一步研究其生物学作用和构建小鼠IgA肾病动物模型提供重要条件.方法 以SA0587的序列为参照,设计出SA0587基因,构建pET28a-SA0587-GFP重组质粒,以Nco Ⅰ/Xho Ⅰ为酶切位点进行双酶切鉴定,同时将符合预期的单克隆进行基因测序,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达菌中;挑取单菌落培养活化后,用诱导剂异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白SA0587;通过SDS-PAGE电泳及Western blot实验鉴定目的蛋白.结果 成功构建了重组质粒并进行双酶切鉴定和基因测序,重组质粒大量诱导表达目的蛋白后镍胶纯化,通过SDS-PAGE电泳及Western blot实验鉴定目的蛋白为SA0587.结论 实验表达和鉴定了SA0587,为后期IgA肾病小鼠模型的建立提供必要条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔凡		6	14	3.0	3.0
2	李良怿		4	2	1.0	1.0
3	周敬敬		1	0	0.0	0.0