最低限度免疫定义基因表达的HCV多表位DNA疫苗对小鼠细胞免疫的诱导作用

• 作者: 朱海超 李昊 温剑平 辛桂杰
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 最低限度免疫定义基因表达 丙型肝炎病毒 多表位 DNA疫苗 干扰素γ
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1071-1075
• 页数: 5页
• 分类号: Q813
• 字数: 3275字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20160606

摘要

目的：探讨采用最低限度免疫定义基因表达法制备丙型肝炎病毒（HCV）多表位 DNA疫苗的可行性，阐明该方法在疫苗领域可能的应用价值。方法：采用人工合成和 PCR 方法制备长度为1346 bp 的含有CMV启动子、HCV 1b亚型多表位和牛生长激素（BCG）多聚腺苷酸序列的最低限度免疫定义基因表达 DNA疫苗，命名为M-HCV-epi；同时制备结构基因被非 HCV同源的DNA序列替换的相同长度DNA片段作为对照，命名为V-pcDNA3.1。12只ICQ小鼠随机分为实验组（n＝6）和对照组（n＝6），分别采用M-HCV-epi DNA和V-pcDNA3.1 DNA各20μg皮下注射。QRT-PCR法检测免疫后小鼠脾细胞中干扰素γ（IFN-γ）mRNA的表达水平；人工合成3个 HCV 1b亚型表位多肽和1条对照多肽。用上述合成的多肽刺激免疫后小鼠脾细胞，ELISA法检测脾细胞刺激上清中 IFN-γ水平。结果：与对照组比较，实验组小鼠脾细胞中 IFN-γmRNA表达水平升高（1.50±0.18）倍（P＜0.05）；加入 aa35-44多肽的实验组小鼠脾细胞培养上清中 IFN-γ水平较对照组明显升高（P＜0.05）。结论：最低限度免疫定义基因表达法制备 HCV多表位 DNA疫苗可诱导细胞免疫反应，该方法在DNA疫苗领域可能具有应用价值。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昊	吉林大学第一医院肝胆胰内科	16	29	3.0	4.0
2	辛桂杰	吉林大学第一医院肝胆胰内科	45	141	7.0	9.0
3	温剑平	吉林大学基础医学院遗传学系	16	47	4.0	6.0
4	朱海超	吉林大学基础医学院法医学系	6	9	2.0	3.0