原代脐静脉内皮细胞NFKB1基因启动子区缺失型较插入型P50蛋白表达降低

• 作者: 古丽那孜·穆哈提 周韵 李芳 杜冬梅 杨毅宁 罗俊一 陈小翠 马依彤
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 化学
• 关键词: 核因子κB(NF-κB) 脐静脉内皮细胞 NFKB1 P50 氧化应激 H2O2
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 352-355,359
• 分类号: R392-33|R541.4|O623.42+4|R654.4
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨核因子κB1基因(NFKB1)启动子区-94位点插入/缺失ATTG碱基(-94ins/del ATTG)多态性在氧化应激中对人原代脐静脉内皮细胞(HUVEC) NF-κB信号通路中P50、P65水平的影响.方法 分离并培养HUVEC,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)法将HUVEC分为插入型(Ⅱ型)、缺失型(DD型)以及杂合子型(ID型),并依据其基因型分型在空白组及H2O2诱导组中分为Ⅱ型、ID型、DD型3个亚组;H2 O2建立HUVEC氧化应激模型,采用CCK-8法检测细胞增殖活性选取最适宜的H2 O2诱导浓度及时间;Western blot法检测各组HUVEC总蛋白及核蛋白P50、P65蛋白水平.结果 共收集23例HUVEC,其中Ⅱ型8例、ID型9例、DD型6例;CCK-8试剂盒确定H2O2诱导浓度为200 μnol/L,诱导时间为12 h;在空白组及H2O2诱导组中纯合子DD型P50蛋白水平均较Ⅱ型显著降低.结论 NFKB1 (rs28362491)基因多态性对P50蛋白表达影响显著.