体外心肌毒性代谢组学样品预处理及UPLC/Q-TOF-MS条件优化

• 作者: 刘昌孝 张兴 张宗鹏 李黎 申秀萍 钱鑫
• 来源期刊: 药物评价研究
• 学科: 医学
• 关键词: 体外心肌毒性 代谢组学 样品预处理 超高效液相色谱-飞行时间质谱 条件优化
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 药动学评价
• 页码范围: 564-571
• 分类号: R965
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2016.04.010

摘要

目的 筛选最佳的体外原代心肌(PC)细胞代谢组学样品预处理方法,对超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)的色谱-质谱条件优化,为建立体外心肌毒性代谢组学研究方法奠定基础.方法 利用UPLC/Q-TOF-MS技术,分别考察0.05％胰酶消化后冰甲醇提取和刮刀刮取后6种不同溶剂提取的心肌细胞样品预处理方法,考察5种流动相梯度洗脱方案和正、负离子检测模式下的基峰离子流图,利用质量控制样本(QC)进行仪器精密度、方法精密度和样本稳定性试验等方法学考察.结果 最佳的心肌细胞样品预处理方法为:0.05％胰蛋白酶-0.02％EDTA消化后-80℃甲醇直接提取.最佳的流动相洗脱程序为:0 min,2.0％ A;2min,25.0％ A:6min,40.0％ A;12min,90.0％ A;保持2min:16min,2.0％A;保持2 min.最佳的质谱检测模式为:正离子模式.本方法的仪器精密度、方法精密度和样本稳定性试验以相对峰面积比值的RSD计分别为4.9％～14.9％、8.6％～17.8％和5.2％～16.3％,以保留时间的RSD计均＜1.0％,符合检测要求.结论 确定了最佳的心肌细胞样品预处理方法及UPLC/Q-TOF-MS分析条件,为建立和完善体外心肌毒性代谢组学研究提供参考依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宗鹏	天津药物研究院天津市新药安全评价研究中心	34	162	7.0	10.0
2	申秀萍	天津药物研究院天津市新药安全评价研究中心	65	355	11.0	15.0
3	钱鑫	贵州省人民医院药剂科	31	90	5.0	8.0
4	李黎	贵州省人民医院药剂科	8	26	3.0	5.0
8	张兴	天津药物研究院天津市新药安全评价研究中心	1	5	1.0	1.0