重组人促红素对高糖诱导乳鼠心肌细胞凋亡的影响

• 作者: 傅聪 刘乃丰 姚玉宇 戴启明 朱月红 陆静 陈兵
• 来源期刊: 中国新药与临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 红细胞生成素 肌细胞,心脏 内质网应激 凋亡
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 350-357
• 页数: 8页
• 分类号: R972
• 语种: 中文
• DOI: 10.14109/j.cnki.xyylc.2016.05.011

摘要

目的 研究重组人促红素(EPO)对高糖诱导乳鼠心肌细胞凋亡的影响,以及内质网应激(ERS)在其中的作用.方法 分离新生SD大鼠心肌细胞,培养72 h后用高糖诱导心肌细胞凋亡,以甘露醇作为高渗对照,并用不同浓度EPO(5、10、20、40 U· mL-1)预处理心肌细胞48 h,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,选取EPO最佳干预浓度;将实验分成五组即正常糖(NG)组、EPO+NG组、高糖(HG)组、EPO+HG组和ERS抑制剂4-苯基丁酸(PBA)+HG组,流式细胞仪测各组凋亡率,激光共聚焦显微镜检测各组钙离子的平均荧光强度,Real-time PCR和Western blot分别检测各组促红素受体(EPOR)、ERS标志物GRP78、钙内流蛋白Serca2a的mRNA和蛋白表达.结果 高糖诱导后心肌细胞凋亡率(41.36±10.49)％,显著高于正常心肌细胞凋亡率(16.08±3.97)％(P＜0.05),甘露醇组对正常心肌细胞凋亡无显著影响(P＞0.05);20 U·mL-1 EPO预处理高糖诱导的心肌细胞后凋亡率为(20.97±10.55)％,为最佳干预浓度.与NG组比较,EPO+NG组各指标均无显著差异(P＞0.05),HG组凋亡率和钙离子荧光强度显著增加,EPOR、Serca2a的mRNA及蛋白表达降低,GRP78 mRNA及蛋白表达升高(均P＜ 0.05);与HG组相比,PBA+HG组和EPO+HG组凋亡率和钙离子荧光强度降低,EPOR、Serca2a的mRNA及蛋白表达升高,GRP78 mRNA及蛋白表达降低(均P＜0.05);PBA+HG组和EPO+HG组各指标均无显著差异(P＞0.05).结论 高糖可通过介导ERS并引发钙稳态失衡诱导心肌细胞凋亡;EPO能够抑制高糖诱导心肌细胞的凋亡,该作用可能与抑制ERS,增强钙内流蛋白表达、维持细胞内钙离子平衡有关.