三种方法培养大鼠结肠平滑肌细胞的比较

• 作者: 吴雄灏 梁恒瑞 王念 王璐 赵磊 陈凤英
• 来源期刊: 中华生物医学工程杂志
• 关键词: 结肠 肌细胞,平滑肌 细胞培养技术 大鼠
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 380-383
• 页数: 4页
• 字数: 3441字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-1927.2016.05.006

摘要

目的 比较3种不同方法培养大鼠结肠平滑肌细胞(CSMC)的生长情况.方法 分离大鼠末端结肠,剥离浆膜层和黏膜层获得平滑肌组织层,将平滑肌组织层剪成小块,采用3种不同方法原代培养大鼠CSMC:(1)贴壁法:将组织块直接接种于培养瓶中.(2)酶解法①:使用0.1％Ⅱ型胶原酶和0.01％大豆胰蛋白酶抑制剂消化组织块2次,然后接种于培养瓶中.(3)酶解法②:使用0.25％胰蛋白酶消化组织块,然后用0.1％Ⅱ型胶原酶和0.01％大豆胰蛋白酶抑制剂消化2次,接种于培养瓶中.按上述3种方法进行大鼠CSMC的原代培养,待细胞长成致密单层后进行传代,观察细胞生长情况并进行免疫荧光检测鉴定细胞类型.结果 贴壁法培养6d可以见细胞从组织块周围游出,但由于细胞数少无法进行传代;酶解法①培养36 h可见少量细胞贴壁,培养15～20 d可以进行传代;酶解法②培养36 h可见较多细胞贴壁生长,培养l0d可以进行传代.酶解法①和酶解法②培养的细胞传代后,细胞形态和生长速度无明显区别.免疫荧光检测显示,3种方法培养的细胞均为α-平滑肌肌动蛋白阳性,90％以上为CSMC.结论 3种培养方法均可得到急性分离的大鼠CSMC,在细胞质量方面无明显差别,实验中可根据具体情况选用不同的培养方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王璐	广州医科大学生理学教研室	5	9	2.0	2.0
2	陈凤英	广州医科大学生理学教研室	3	7	2.0	2.0
3	吴雄灏	广州医科大学生理学教研室	3	7	2.0	2.0
4	赵磊	广州医科大学生理学教研室	7	54	3.0	7.0
5	梁恒瑞	广州医科大学南山学院	4	6	1.0	2.0
6	王念	广州医科大学生理学教研室	1	1	1.0	1.0