大鼠胰岛细胞的分离培养与鉴定

• 作者: 何铁英 林海 王松 程坤 苏力担卡扎·仇曼 郝晓文 陈启龙 韩玮
• 来源期刊: 肝胆胰外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 胰岛细胞 分离 培养 鉴定 大鼠
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 389-392
• 页数: 4页
• 分类号: Q813
• 字数: 3448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11952/j.issn.1007-1954.2016.05.010

摘要

目的 探讨胰岛细胞的分离、培养与鉴定.方法 从实验室中挑选出30只成年雄性大鼠,将胶原酶注入大鼠的胰腺导管,聚蔗糖梯度离心法分离胰岛细胞,并培养与鉴定胰岛细胞.培养1周后用双硫腙(DTZ)行胰岛细胞鉴定.用丫啶橙(Ao)、碘丙啶(PI)检测胰岛细胞活性.结果 经过分离与纯化,大鼠胰岛细胞的获得率较高且较稳定;分离后的胰岛细胞在适宜环境中生长,生长状态较佳,在培养后的12 ～ 24 h可贴壁,在培养后4～5d细胞生长状态达到顶峰,细胞完好,且折光性能优异.利用免疫组化法鉴定胰岛细胞,分离的细胞SMA及PDGFR表达呈阳性,少数细胞vWF表达呈阳性.结论 我科此次分离纯化大鼠胰岛细胞的方法为逆行灌注胶原酶+原位消化+Fico11液梯度分离法,实验结果显著,能在一定程度上获取纯度较高的大鼠胰岛细胞.分离后的胰岛细胞在培养4～5d后达到最佳状态,适用于作为实验室胰岛细胞功能深入研究的实验材料.