高糖对THP-1细胞TLR4介导的信号调节的影响

• 作者: 刘东梅 史志勤 尹晓琳 曹爽 朱立坤 胡佳 魏艳静
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: TLR4 糖尿病肾病 巨噬细胞 LPS HSP60
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 953-957
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20160184

摘要

目的 探讨高糖状态下巨噬细胞株THP-1经TLR4不同配体刺激后信号通路激活的改变,明确巨噬细胞激活在糖尿病肾病中的炎症机制.方法 用正常和高糖培养THP-1细胞,用TLR4的配体LPS和HSP60刺激,收集上清和细胞,采用ELISA和Real-time PCR检测IL-10、IL-1β、TNF-α的蛋白及mRNA的表达水平,用Western blot检测NF-κB(P65)、AKT(Ser473)介导的信号通路分子的表达水平.结果 高糖刺激下IL-10 mRNA表达的高峰值晚于正常组,出现延迟现象,但蛋白表达无明显变化.而IL-1β和TNF-α无论mRNA和蛋白水平的表达均高于正常对照组.Western blot结果显示LPS刺激细胞0、15、30、60、120、180 min,正常组P-NF-κB p65的表达于60 min达到高峰,而高糖组15 min时达到高峰,P-AKT的表达于60 min时表达增高,高糖组在同一时间点总体高于正常组;高糖状态下LPS和HSP60刺激细胞0、30、60、180 min后,P-NF-κB p65、P-AKT(Ser473)均高于对照组.结论 高糖状态能促进TLR4介导的促炎因子的表达,不同配体刺激的结果相似.