DHPLC技术鉴定玉米杂交种真实性及纯度

• 作者: 周慧平 彭梓 王利兵 袁小雅 谭建锡 黄迎波
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: SNP InDel 玉米 真实性鉴定 纯度检验 变性高效液相色谱技术(DHPLC)
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 125-133
• 分类号: S513
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.01.016

摘要

变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography, DHPLC)技术可用于检测玉米(Zea mays)品种的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)和插入/缺失(Insertion/Deletion,InDel)的多态性遗传标记.为验证DHPLC技术在玉米分子标记分析中应用的可行性和可靠性,本研究基于公共数据库中的玉米基因信息,筛选2条DNA序列作为目标分析片段,利用DHPLC技术平台对10份玉米杂交种及其亲本进行检测.2条目标分析片段的DHPLC分析结果显示,玉米杂交种产生的DHPLC谱图具有多态性,基于Amp Ⅰ片段,10份玉米杂交种产生3类DHPLC图谱,基于AmpⅡ片段,可产生7种图谱类型,不同类型的DHPLC图谱在峰的数量和峰的保留时间上存在明显差异.测序结果显示DHPLC谱型与基因型一一对应,即使只有一个碱基差异的两种基因型样本,也将产生不同峰型特征的DHPLC图谱.10份玉米杂交种中,除3份杂交种的两条目标片段的DHPLC峰型均一致以外,其余7份杂交种相互之间至少存在一个DHPLC谱型的差异从而可以获得有效区分.实验结果也显示所有杂交种均与其亲本混合样本的DHPLC图谱一致.利用该特征,可以认为通过比对玉米杂交种子和育种亲本混合样本的DHPLC图谱峰型,实现对杂交种子真实性和纯度的鉴定.DHPLC分辨率高、快速、操作简单、安全等优点,将是杂交玉米种子真伪和纯度快速鉴定的有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王利兵	湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心	24	252	9.0	15.0
2	彭梓	湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心	13	60	5.0	7.0
3	周慧平	湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心	8	25	3.0	4.0
4	谭建锡	湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心	9	38	4.0	6.0
5	袁小雅	湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心	2	5	1.0	2.0
6	黄迎波	湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心	9	31	3.0	5.0