ox-LDL诱导泡沫细胞形成中AnnexinⅡ的表达改变及意义

• 作者: 刘丹 刘青 吴梦晴 李宙雪 沈小丹 温见炳 黄起壬 龙楚彦
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胆固醇 氧化型低密度脂蛋白 AnnexinⅡ 巨噬细胞 泡沫细胞
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 541-546
• 分类号: R363
• 语种: 中文

摘要

目的 观察AnnexinⅡ在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导泡沫细胞形成中表达的改变及其与细胞内胆固醇酯(CE)/总胆固醇(TC)比值(CE/TC)改变的相关性,从而探讨AnnexinⅡ在ox-LDL诱导泡沫细胞形成中的意义.方法 常规培养RAW264.7单核细胞株,待细胞长至90％汇合度时,分别加入不同浓度的ox-LDL(50、100、200 mg/L)孵育24 h,以未经氧化修饰的天然低密度脂蛋白(n-LDL,200 mg/L)为阴性对照,测定细胞内TC和CE含量,油红O染色鉴定泡沫细胞;比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释出量和MTT法检测细胞存活率来观察ox-LDL对细胞的毒性作用;RT-PCR和Western blot检测AnnexinⅡmRNA和蛋白的表达水平.结果 不同浓度的ox-LDL(50、100、200 mg/L)孵育24 h,仅200 mg/L ox-LDL组细胞活力显著降低,LDH释出量显著升高,与n-LDL(200mg/L)组比较差异具有显著性(P＜0.01),50 mg/L和100 mg/L ox-LDL对细胞活力和LDH释出量无显著影响(P＞0.05);CE/TC比值分别是55.0％±6.7％、61.8％±4.8％和59.6％±5.2％,与n-LDL(200mg/L)组比较差异均具有显著性(P＜0.05),其中浓度为100 mg/L的ox-LDL作用最显著;ox-LDL呈浓度依赖性抑制AnnexinⅡmRNA和蛋白的表达,AnnexinⅡmRNA和蛋白的表达改变与CE/TC比值呈负相关(r1=-0.9374,P＜0.05;r2 =-0.9548,P＜0.05).结论 ox-LDL呈浓度依赖性抑制AnnexinⅡ表达,提示其可能影响细胞内胆固醇自平衡从而诱导泡沫细胞形成.