COMMD7基因活化 PI3K/AKT 信号通路促进 HepG2细胞增殖转移的分子机制研究

• 作者: 尤楠 李靖 谭晔 邓昌林 郑璐 顾勋鑫
• 来源期刊: 局解手术学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞癌 COMMD7 PI3K/AKT 信号通路 PTEN 去甲基化
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 313-317,318
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7
• 字数: 5123字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11659/jjssx.03E016005

摘要

目的：探索肝癌相关基因 COMMD7促进 HepG2细胞增殖转移的分子机制。方法设计针对 COMMD7基因的特异性 siRNA（small interference RNA）转染人类肝癌细胞株 HepG2，作为干扰组（Si-HepG2）；并设置 PTEN 抑制剂处理组（Si ＋BpV-HepG2）；空白对照组（HepG2）；空载体对照组（N-HepG2）。qRT-PCR 检测转染后各组 COMMD7、PTEN 基因 mRNA 的表达变化；Western blot 检测各组 COMMD7、PTEN、p-AKT 和 AKT 蛋白的表达变化；MSP 法检测 PTEN 基因甲基化水平；CCK8法检测细胞增殖能力；Transwell 实验检测细胞在转染前后转移及侵袭能力的改变。结果siRNA-COMMD7转染 HepG2细胞后，qRT-PCR 检测结果显示，与空白对照组及空载体对照组相比较干扰组 COMMD7基因的表达量降低89．9％，PTEN 基因的表达量升高2．841倍，差异均有统计学意义（P ＜0．05）；Western blot 检测结果显示，siRNA 干扰组 COMMD7表达明显降低，PTEN 表达升高；下游 p-AKT 表达受到显著抑制；PTEN 抑制剂处理组 PTEN 表达受到显著抑制，下游 p-AKT 的表达明显增强；MSP 法检测结果显示，干扰组与空白对照组及空载体对照组比较，PTEN 发生明显的去甲基化，表明抑制 COMMD7表达可诱导 PTEN 去甲基化。CKK8实验结果显示，干扰组细胞较空白对照组、空载体对照组和 PTEN 抑制剂处理组增殖速度明显降低，差异均有统计学意义（P ＜0．05）；Transwell 实验实验结果显示，干扰组穿膜细胞数（17．4±2．7），较空载体对照组（36．2±3．2）、空白对照组（41．6±4．5）及 PTEN 抑制剂处理组（47．6±1．8）明显减少，差异均有统计学意义（P ＜0．05）。结论siRNA 干扰下调 COMMD7基因的表达，可诱导 HepG2细胞内抑癌基因 PTEN 的去甲基化，增加 PTEN 蛋白的表达而抑制 PI3K／AKT 信号通路，以降低 HepG2细胞的增殖、迁移及侵袭能力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李靖	第三军医大学新桥医院肝胆外科	83	480	12.0	17.0
2	郑璐	第三军医大学新桥医院肝胆外科	43	235	8.0	12.0
3	尤楠	第三军医大学新桥医院肝胆外科	8	33	4.0	5.0
4	顾勋鑫	第三军医大学新桥医院肝胆外科	2	4	1.0	2.0
5	谭晔	第三军医大学新桥医院肝胆外科	1	0	0.0	0.0
6	邓昌林	第三军医大学新桥医院肝胆外科	3	3	1.0	1.0