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摘要:
[目的]本研究通过克隆小白菜光合暗反应中限制核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)再生的关键酶景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(sedoheptulose-1,7-bisphosphatase,SBPase)基因,分析铜胁迫及添加外源一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)缓解铜胁迫时该基因的表达情况,并将其与对应处理下小白菜净光合速率(Pn)的变化情况结合在一起进行分析,以期为全面了解外源NO缓解铜胁迫植物光合作用机理提供理论依据.[方法]以小白菜品种“上海青”3~4片真叶大的幼苗为材料,采用RT-PCR技术克隆小白菜SBPase基因,铜处理浓度为200 μmol/L,外源NO供体SNP浓度为300μmol/L,同时设置相关的4个对照组排除其他可能因素的干扰,在添加处理液后的0、4、8、12d上午九点测定各处理小白菜相同节位叶片的净光合速率,并利用实时荧光定量PCR技术检测在对应的处理时间及对应节位小白菜叶片中SBPase基因的表达情况.试验环境条件为光照强度200 μmol/(m2·s),光周期12 h,温度25℃/18℃.[结果]1)克隆得到小白菜SBPase基因(Genbank登录号:AHY18974.1),开放阅读框为1182 bp,编码393个氨基酸,蛋白质分子量为42.34kD,理论等电点为5.85.2)序列分析表明其含有氧化还原活性位点,包含一个具有59个氨基酸残基的叶绿体转移肽序列.小白菜SBPase基因推导的氨基酸序列与其他物种中已分离的SBPase编码的氨基酸序列具有很高的同源性.3)实时荧光定量PCR分析表明,SBPase基因在铜胁迫下的小白菜叶片中表达量下降,且随着胁迫时间的延长下降程度加剧;而在铜胁迫的基础上添加外源NO可以在一定程度上缓解铜胁迫引起的小白菜叶中SBPase基因表达量的下降.4)铜胁迫下小白菜叶片Pn显著下降,且随着胁迫时间的延长,Pn下降加剧,施加外源NO后Pn的下降得到一定程度的缓解,各处理下Pn的变化与SBPase基因表达量变化趋势一致.[结论]铜胁迫及在铜胁迫的基础上添加外源NO后小白菜叶片中SBPase基因表达量的变化,可能是影响对应条件下小白菜叶片的净光合速率变化的原因之一.
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文献信息
篇名 外源NO对铜胁迫下小白菜SBPase基因表达特性及其光合速率的影响
来源期刊 植物营养与肥料学报 学科 农学
关键词 小白菜 铜胁迫 一氧化氮 景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶 实时荧光定量PCR
年,卷(期) 2016,(3) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 736-743
页数 8页 分类号 S634.3.601|Q945.78
字数 4504字 语种 中文
DOI 10.11674/zwyf.14554
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 钟凤林 福建农林大学园艺学院 92 414 11.0 14.0
2 林义章 福建农林大学园艺学院 77 941 15.0 27.0
3 叶丽萍 福建农林大学园艺学院 6 23 3.0 4.0
4 林琳琳 福建农林大学园艺学院 5 18 3.0 4.0
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小白菜
铜胁迫
一氧化氮
景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶
实时荧光定量PCR
研究起点
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期刊影响力
植物营养与肥料学报
月刊
1008-505X
11-3996/S
大16开
北京中关村南大街12号
82-169
1994
chi
出版文献量(篇)
3541
总下载数(次)
1
总被引数(次)
135501
相关基金
福建省自然科学基金
英文译名:Natural Science Foundation of Fujian Province of China
官方网址:http://www.fjinfo.gov.cn/fz/zrjj.htm
项目类型:重大项目
学科类型:
论文1v1指导