VP22-CD基因工程化载体对胶质瘤细胞体外杀伤作用的研究

• 作者: 刘福生 周益强 张俊文 徐恒周 程森 米蕊芳 金贵善
• 来源期刊: 中华神经外科杂志
• 关键词: 神经胶质瘤 CD/5-FC系统 旁观者效应 穿梭蛋白VP22
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 614-618
• 页数: 5页
• 字数: 3435字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-2346.2016.06.020

摘要

目的 构建CD以及VP22-CD基因工程化载体,并探讨其在体外对胶质瘤细胞的杀伤作用.方法 利用聚合酶链式反应(PCR)得到CD以及VP22基因片段;利用In-fusion基因克隆方法将得到的基因片段插入到pEGFP-N1载体中,构建CD以及VP22-CD基因工程化载体;利用脂质体转染的方法将构建的基因工程化载体转染到胶质瘤细胞C6及U87细胞中,并通过体外光镜及荧光显微镜观察转染率;利用MTT比色法评价加入前药5-氟胞嘧啶后对转染后胶质瘤细胞的杀伤率.结果 (1)将CD基因或VP22-CD融合基因插入到pEGFP-CD载体中,构建得到pEGFP-CD以及pEGFP-VP22-CD载体.(2)pEGFP-CD及pEGFP-VP22-CD载体可转染入C6或U87胶质瘤细胞,转染率分别为2.5％和3.7％以及2.0％和4.1％.(3)在C6或U87细胞中转染pEGFP-CD或pEGFP-VP22-CD载体并加入前药5-氟胞嘧啶后,细胞的存活率分别为(30.36±0.63)％和(11.75±1.01)％以及(28.78±3.62)％和(18.26±2.27)％,与转染pEGFP-N1组相比差异均有统计学意义(均P＜0.05).(4)在C6或U87细胞中加入前药5-氟胞嘧啶后,转染pEGFP-VP22-CD组与转染pEGFP-CD组相比差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 CD/5-FC系统在体外对恶性胶质瘤细胞具有显著的杀伤作用和旁观者效应;并且穿梭蛋白VP22可进一步促进系统对细胞的杀伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘福生	100050 首都医科大学北京市神经外科研究所	15	74	5.0	8.0
3	金贵善		7	13	3.0	3.0
4	米蕊芳		3	3	1.0	1.0
5	周益强		3	8	2.0	2.0
6	徐恒周		2	5	1.0	2.0
7	程森		3	13	2.0	3.0
8	张俊文		2	0	0.0	0.0