高致病性维氏气单胞菌胞外产物对斑点(鱼回)的致病性

• 作者: 华丽 吴学婧 杨倩 汪开毓 王二龙 王兴丽 王均 贺扬 陈德芳
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 斑点(鱼回) 维氏气单胞菌 胞外产物 致病性
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 页码范围: 457-467
• 分类号: Q935|S941.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20150910060

摘要

为了研究维氏气单胞菌及其胞外产物的致病机制对预防和治疗斑点(鱼回)维氏气单胞菌病的作用.通过对一株高致病性斑点(鱼回)源维氏气单胞菌胞外产物(extracellular product,ECP)的提取并结合体内外实验研究其酶活性与致病性,以期为维氏气单胞菌的致病机制研究提供新思路.采用饱和硫酸铵沉淀法,对一株高致病性的斑点(鱼回)源维氏气单胞菌的ECP进行了提取,将其进行浓度检测、SDS-PAGE分析和酶活测定;并将提取的ECP攻毒斑点(鱼回),通过病理学分析研究其致病机制.提取的ECP经考马斯亮蓝试剂盒确定其浓度为0.743 mg/mL;SDS-PAGE分析发现该ECP类型丰富,分子大小主要集中在20.0～33.0 ku.运用琼脂平板扩散法对ECP中主要毒力和代谢相关酶活性进行体外测定,发现ECP具有脂酶、蛋白酶、卵磷脂酶、DNA酶和溶血活性,不具有淀粉酶、明胶酶、脲酶活性;并对与毒力密切相关的溶血活性进行了进一步的溶血谱绘制,发现ECP对其他多种动物红细胞都有溶血活性,对鱼类红细胞溶血性较强,但对鸡、鸭红细胞无溶血活性.ECP攻毒健康斑点(鱼回)后,发现其具有明显致病性,死亡率高达100％.病鱼大体病理变化为体表黏液增多,出现褪色斑以及不同程度的出血斑;眼球充血;肛门红肿外凸;剖检病变表现:鳃丝充血肿胀、肝脏肿大、散在少量出血点,脾脏肿大暗红,肠道扩张、肠壁变薄、肠腔内有大量黄色黏液.组织学病变主要表现为肝细胞变性、坏死;脾脏淋巴细胞减少,大量结缔组织增生;胃、肠道黏膜上皮坏死脱落.该株维氏气单胞菌的胞外产物具有多种酶活性,且对斑点(鱼回)具有明显的致病性,推测该胞外产物在维氏气单胞菌入侵、感染甚至致死斑点(鱼回)过程中都发挥了重要作用.