中缅边境恶性疟原虫对青蒿素类药体外敏感性检测和K-13基因突变的相关性研究

• 作者: 吴艳瑞 张艳梅 李思熳 王丽琼 王颖娜 胡月 贾丹丹 阮永华 马宁
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 恶性疟原虫 青蒿素类药物 耐药机制 PF3D7_1343700
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 219-223
• 页数: 5页
• 分类号: R382.3
• 字数: 3739字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.03.002

摘要

目的 研究中缅边境恶性疟原虫对青蒿素类药物抗药机制.方法 收集分离自2008-2010年中缅边境确诊为恶性疟病人体内的疟原虫,共34株,进行体外培养;提取原虫血DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)方法,扩增PF3D7-1343700(K-13)基因,对目标基因进行全基因测序,检测K13基因变异情况;依据基因有无变异分为两组,对比两个组别疟原虫对3种抗疟药青蒿琥酯(Artesunate,AS)、双氢青蒿素(Dihydroartemisinine,DHA)和青蒿素(artemisinin,ART)的半效抑虫浓度(IC50值),并与野生株3D7做对比;随后将这些疟原虫在环状体时期暴露于大剂量的DHA下,6h后洗尽药物,再经过66 h培养后涂片,计算生存率(RSA),比较变异株和非变异株之间有无差异.结果 检测发现疟原虫K13基因存在137-142位点NN插入(占82.4％),另有E252Q、F446I、C469Y、R539T、P553L、P574L、H719N位点突变,均伴有NN插入,其中F446I(占44.1％).病人株的IC50值和野生株无统计学差异(P＞0.05),但病人株的RSA高于野生株(P＜0.05);有K13基因变异组和无变异组对AS、DHA、ART的IC50值无统计学差异(P＞0.05),但有基因变异组的RSA高于无基因变异组(P＜0.05).结论 本研究结果发现K-13基因变异与恶性疟原虫对青蒿素类药物抗药性可能相关.