水貂阿留申病毒纳米PCR检测方法的建立与初步应用

• 作者: 单虎 张传美 张洪亮 杨瑞梅
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 水貂阿留申病病毒 纳米PCR 检测
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 2288-2293
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 4903字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.017

摘要

为建立便捷、灵敏的水貂阿留申病病毒(AMDV)纳米PCR检测方法,根据AMDV NS1基因的保守序列设计一对特异性引物,对纳米PCR反应的退火温度、胶体金浓度进行了优化;测序检测扩增基因是否发生变异;对特异性和灵敏度进行了评估.结果表明,此纳米PCR的最佳退火温度为51℃,普通PCR为55℃;加入胶体金最佳浓度在0.2～0.8 nmol·L-1,纳米PCR与普通PCR产物测序相似性大于99％.特异性检测表明该纳米PCR方法只扩增AMDV而不能扩增犬瘟热病毒和水貂肠炎细小病毒.在粪尿样品检测中该纳米PCR敏感性比普通PCR高10倍.检测40份临床样品,结果表明该方法比对流免疫电泳检测敏感性提高,从而为用粪、尿等低病毒样品检测水貂阿留申病提供了一种新的有效方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单虎	青岛农业大学动物科技学院山东省预防兽医重点实验室	183	631	12.0	17.0
2	张传美	青岛农业大学动物科技学院山东省预防兽医重点实验室	32	92	6.0	9.0
3	杨瑞梅	青岛农业大学动物科技学院山东省预防兽医重点实验室	26	85	6.0	8.0
4	张洪亮	青岛农业大学动物科技学院山东省预防兽医重点实验室	16	66	6.0	7.0