水貂阿留申病毒、肠炎病毒与犬瘟热病毒多重PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 王元智 赵丽丽 闫文卓 陆涛峰 陈洪岩 马芹
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多重PCR 水貂阿留申病毒 水貂肠炎病毒 犬瘟热病毒
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 97-101
• 页数: 5页
• 分类号: R-33
• 字数: 3434字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.017

摘要

目的 水貂阿留申病、病毒性肠炎与犬瘟热并称影响水貂健康的三大疫病,拟建立一种可同时检测三种病毒的多重PCR检测方法.方法 针对三种病毒基因保守区分别设计了3对特异性引物,对貂阿留申病毒(ADV)和水貂肠炎病毒(MEV)的DNA模板和犬瘟热病毒(CDV)的RNA模板进行了多重PCR扩增和扩增条件优化.结果 PCR可同时扩增出601 bp(ADV)、205 bp(MEV)和451 bp(CDV)的特异性目的条带,敏感性试验表明最低核酸检出量为ADV每微升2.67×104拷贝、MEV每微升3.02×104拷贝和CDV每微升1.72×105拷贝.临床样品检测结果表明多重PCR和单一PCR检测结果一致.结论 建立的多重PCR检测方法可快速地检测ADV、MEV和CDV单一或混合感染的临床样品.