KLF4在低氧诱导肺动脉平滑肌细胞增殖及表型转化中的作用初步研究

• 作者: 张爱珍 施熠炜 杜永成 聂欣
• 来源期刊: 国际呼吸杂志
• 关键词: 肺动脉 平滑肌 细胞低氧 细胞分化 细胞增殖 KLF4
• 年，卷（期）: 2016,（17）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1319-1325
• 页数: 7页
• 字数: 5575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-436X.2016.17.008

摘要

目的：本实验通过观察低氧诱导大鼠原代肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cell,PASMC)增殖与分化标志改变过程中,krǖppel 样因子4(krǖppel-like factor 4, KLF4)表达的变化,并检测 KLF4过表达对该过程的影响,探讨 KLF4是否在其中担当一定作用。方法采用贴片法培养原代 PASMC,低氧(5%O 2)培养24 h、48 h、72 h 后,以正常氧浓度培养细胞为对照,采用实时荧光聚合酶链反应(real-time PCR)、Western blot 及免疫共沉淀方法,观察低氧24 h、48 h、72 h,PASMC 中 KLF4乙酰化水平及表达水平的变化。cck-8检测细胞增殖情况,碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期,提取细胞总 RNA 和蛋白,采用 real-time PCR、Western blot 方法检测细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达水平,综合分析低氧对细胞增殖的影响,同时采用 real-time PCR、 Western blot 方法检测 PASMC 分化标志物平滑肌肌动蛋白α(smooth muscleα-action,SMα-actin)的表达水平。通过转染 KLF4表达质粒,提高 PASMC 中 KLF4的表达水平,检测细胞周期、增殖活力及 PCNA、SM α-actin 的变化,观察低氧下 KLF4过表达对PASMC 增殖、分化的影响。结果低氧24 h,PASMC 中 KLF4表达水平均较常氧培养细胞明显增高,期间 SMα-actin 表达较常氧培养细胞明显减少,PASMC 增殖不明显。随后 KLF4表达水平逐渐降低,至72 h 降低至正常水平,而 SMα-actin 逐渐增高,同时 PASMC 增殖活力明显增强,S 期细胞逐渐增多。KLF4过表达后,低氧刺激 PASMC 增殖活力明显降低,SMα-actin 表达水平也降低,细胞阻滞于 G1期。结论低氧诱导 PASMC 发生去分化与增殖不同步；KLF4参与调节低氧诱导的PASMC 表型转化与增殖过程,该作用涉及 KLF4乙酰化水平改变。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施熠炜	山西医科大学第一医院呼吸科	19	35	3.0	4.0
2	张爱珍	山西省人民医院呼吸科	33	86	5.0	8.0
3	杜永成	山西省人民医院呼吸科	24	46	3.0	5.0
4	聂欣	山西省人民医院呼吸科	1	0	0.0	0.0