葎草花粉主要变应原Hum s1的表达、纯化与结构预测

• 作者: 刘昀 吴媛媛 孙秀珍 徐晶
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 葎草花粉 重组变应原 基因克隆
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-18
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆、表达、纯化葎草花粉主要变应原Hum s1,预测、分析其蛋白结构及功能,为评估该重组变应原的诊断及治疗效果奠定基础.方法 采用PCR扩增目的基因Hum s1,并将Hum s1通过Kpn Ⅰ/Xho Ⅰ位点克隆到pET32a表达载体,转化到克隆菌株E.coli DH5α,用PCR验证重组载体,并将表达载体转化至表达菌株E.coli BL-21,IPTG诱导表达目标基因,利用快速蛋白液相色谱技术纯化融合蛋白,并对表达蛋白的结构与功能进行预测分析.结果 成功构建原核表达质粒pET32a-G2,并表达纯化葎草花粉主要变应原Hum s1,纯度达90％以上.分析其结构含有3个潜在的抗原表位,2个EF-手型结构域,成功构建其三维模型.ELESA试验证明重组蛋白能与葎草花粉过敏患者血清结合,具有免疫学活性.结论 成功构建了葎草花粉变应原Hum s1的原核表达载体,表达并纯化了重组蛋白,并通过生物信息学方法获得了目的蛋白的抗原表位和三维结构模型,为进一步开展重组疫苗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘昀	西安交通大学第二附属医院呼吸科	60	271	9.0	12.0
2	孙秀珍	西安交通大学第二附属医院呼吸科	76	424	11.0	16.0
3	吴媛媛	西安交通大学第二附属医院呼吸科	16	37	3.0	4.0
4	徐晶	西安交通大学第二附属医院呼吸科	9	27	2.0	4.0