两种快速鉴定甘草方法的比较

• 作者: 何芳 孟菊 杨志刚 蒋丹 马敏敏 黄耀江
• 来源期刊: 中药材
• 学科: 医学
• 关键词: 甘草 荧光定量PCR 环介导等温核酸扩增 特异性扩增 灵敏度
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 资源和鉴别
• 页码范围: 2725-2729
• 页数: 5页
• 分类号: R282.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2016.12.012

摘要

目的:建立快速检测中药材甘草的荧光定量PCR和环介导等温核酸扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)两种技术,并对它们的特异性和灵敏性进行比较.方法:以中药材甘草作为实验对象,提取DNA后,用设计的PCR引物及LAMP引物组合分别对甘草进行普通PCR、荧光定量PCR以及LAMP实验,检测引物的特异性,同时建立模板DNA的浓度梯度,对荧光定量PCR及LAMP的灵敏性进行检测.结果:甘草的特异性序列可以通过荧光定量PCR得到有效扩增,而与甘草相近的混伪品结果显示阴性.荧光定量PCR最低可检测到甘草的浓度为0.67×10-4ng/μL.在LAMP特异性检测中,甘草出现浊度值,其他混伪品显示阴性.灵敏度性检测中,LAMP检测在60 min反应时间内同样检测到的甘草的最低DNA浓度为0.67×10-4 ng/μL,反应产物加入荧光染料SYBR Green Ⅰ后反应液呈现肉眼可观察的明显的亮绿色.结论:LAMP检测和real-time PCR检测具有相似的特异性、灵敏度和精确性,但LAMP检测方法更为简单、方便,所需时间更短,而且不需要昂贵的仪器.因此,LAMP检测中药的方法更适合于对中药材甘草检测的推广使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄耀江	中央民族大学生命与环境科学学院	26	199	8.0	13.0
2	蒋丹	辽宁出入境检验检疫局检验检疫技术中心	16	91	6.0	9.0
3	马敏敏	中央民族大学生命与环境科学学院	6	9	2.0	2.0
5	孟菊	中央民族大学生命与环境科学学院	2	3	1.0	1.0