分离、鉴定与培养大鼠肝细胞、肝星状细胞和Kupffer细胞

• 作者: 庄伟 方建凤 李玉梅 蔡伟祥
• 来源期刊: 温州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞分离 肝细胞 肝星状细胞 kupffer细胞
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 页码范围: 638-643,648
• 页数: 7页
• 分类号: R575.2
• 字数: 5260字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-9400.2016.09.004

摘要

目的：建立稳定的同时分离原代大鼠肝细胞（HC）、肝星状细胞（HSC）和kupffer细胞（kC）的方法，并初步评估其在体外培养的特征。方法：通过胶原酶原位灌注获得肝脏单细胞悬液，随后行等密度离心结合选择性贴壁纯化肝脏原代细胞，细胞的产量和活力经自动细胞计数仪计算出，纯度经免疫荧光、特殊染色及吞噬等实验进行鉴定。结果：大鼠原代HC产量为（21.0±8.2）×106/g肝组织，活力为92.1%±2.1%，纯度为96.5%±2.2%；原代HSC产量为（2.5±0.8）×106/g肝组织，活力为90.1%±3.8%，纯度为93.1%±1.5%；原代kC产量为（4.1±1.2）×106/g肝组织，活力为96.2%±2.7%，纯度为95.1%±1.4%。分离的HC、HSC和kC适合体外长期培养。HSC在体外培养过程中失去维生素A，逐渐向成纤维细胞表型转变。kC在体外可增殖，至14 d时仍表达CD68，具有较强的吞噬能力。结论：成功建立同时分离和培养大鼠HC、HSC和kC的方法，为进一步研究肝脏病理生理提供细胞基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉梅	武警浙江总队嘉兴医院消化内科	32	126	7.0	10.0
2	蔡伟祥	武警浙江总队嘉兴医院消化内科	9	22	3.0	4.0
3	庄伟	武警浙江总队嘉兴医院消化内科	8	41	4.0	6.0
4	方建凤	武警浙江总队嘉兴医院消化内科	4	15	3.0	3.0