大鼠正常肝和再生肝的肝细胞分离、鉴定及纯度、活性分析

• 作者: 徐存拴 王文博 王望 王磊 谢来峰
• 来源期刊: 河南科学
• 关键词: 大鼠 细胞分离和鉴定 肝细胞 基因表达 标记蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 页码范围: 1492-1498
• 页数: 7页
• 分类号: Q2-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3918.2008.12.018

摘要

按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll密度梯度离心分离肝细胞,用免疫组织化学方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的肝细胞中白蛋白(albumin,ALB)和葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G-6-P),用蛋白免疫印迹方法定量肝细胞的ALB和G-6-P,用RT-PCR定量肝细胞的ALB和G-6-P mRNA.初步证实纯化的细胞中,ALB和G-6-P阳性细胞占96%以上;PH后各时间点纯化的肝细胞的ALB和G-6-P mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进后的分离肝细胞方法具有收率高、纯度高、活性好等特点.