心肌细胞中微小核糖核酸 let-7c对肌营养素基因表达的调控作用

• 作者: 刘铭 王玉瑶 王玉璇 翟翔 解军
• 来源期刊: 中国循环杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小核糖核酸 肌营养素 核转录因子-κB
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 基础与实验研究
• 页码范围: 1215-1218
• 页数: 4页
• 分类号: R541
• 字数: 4098字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3614.2016.12.015

摘要

目的：探讨心肌细胞中微小核糖核酸（miR）let-7c（miR-let-7c）对肌营养素基因表达是否具有调控作用以及可能的作用机制。<br>　　方法：首先构建携带肌营养素基因3'非编码区（3'-UTR）片段的荧光素酶报告基因载体，与miR-let-7c前体共转染Hela细胞，双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性以验证miR-let-7c与肌营养素基因的靶向调控关系。进而培养大鼠心肌细胞H9c2，Taqman实时定量聚合酶链式反应（PCR）法检测miR转染效果，蛋白免疫印迹（Western blot）法检测miR-let-7c及miR-let-7c抑制物转染心肌细胞后肌营养素蛋白表达，以及心肌肥厚相关信号通路分子核转录因子-κB（NF-κB）的活性变化。<br>　　结果：荧光素酶活性实验结果表明，与重组荧光素酶报告基因表达载体（pMIR-MTPN）+ miR前体阴性对照组相比，pMIR-MTPN+ miR-let-7c前体组荧光素酶活性显著降低[（59.30±9.90）% vs （98.10±15.10）%]。Western blot结果表明，miR-let-7c前体组与miR阴性对照组相比，肌营养素蛋白表达水平显著降低[（0.28±0.05） vs （0.90±0.09）]，此外，NF-κB蛋白水平显著降低[（0.25±0.06） vs （0.75±0.07）]；相反，miR-let-7c抑制物组与抑制物阴性对照组相比，肌营养素蛋白表达水平显著升高[（1.14±0.09） vs（0.44±0.09）]，同时，NF-κB蛋白水平也显著升高[（1.09±0.05） vs（0.71±0.06）]，差异均有统计学意义（P <0.05）。<br>　　结论：miR-let-7c能够通过作用于3'UTR区域，抑制肌营养素基因表达，并影响心肌肥厚关键信号通路分子NF-κB的活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	解军	山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	142	537	11.0	15.0
2	刘铭	山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	8	18	3.0	3.0
3	王玉璇	山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	9	13	2.0	3.0
4	王玉瑶	山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	9	7	1.0	2.0
5	翟翔	山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	3	7	1.0	2.0