越南人参皂苷R7抑制LPS及TNF-α联合诱导大鼠星形胶质细胞C6的激活作用研究

• 作者: 兰云意 吴晓俊 吴辉 张蓓蓓 李鸿丽 王晓双 石海莲 秦力悦 黄韬
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 神经炎症 越南人参皂苷R7 脂多糖 炎症因子 NF-κB 星形胶质细胞
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 1498-1503
• 语种: 中文
• DOI: 10.4268/cjcmm20160822

摘要

该研究旨在探讨越南人参皂苷R7(R7)对LPS及TNF-α联合诱导下大鼠星形胶质细胞C6的激活抑制作用及机制.取对数生长的C6细胞,在无血清的DMEM培养基中饥饿培养24h后,使用0.25％胰酶将其消化收集,按1.5×106个/mL密度接入培养板中培养过夜.实验分组如下:对照组(无药物处理),模型组(LPS1 mg·L-1,TNF-α 10 μg·L-1处理24 h),给药组(分别用6.25,12.5,25,50,75 μmol·L-1 R7,4μmol·L-1 L-NMMA预处理2h后,再经过LPS 1 mg· L-1,TNF-α 10μg·L-1刺激24 h).处理之后,CCK-8法检测细胞活力,Griess法检测培养基中NO含量,ELISA法检测培养基中IL-6,TNF-α浓度,实时定量PCR法检测细胞中相关炎症基因的表达,双荧光素酶报告基因法检测细胞中NF-κB信号分子的激活.研究发现,与模型组相对比,R7量效相关性降低C6细胞的NO释放水平,其IC50约为34 μmol·L-1;同时,R7减少LPS及TNF-α刺激造成的细胞增殖.50 μmol·L-1 R7可以显著降低iNOS (P ＜0.001),TNF-α(P＜0.001),IL-1β(P＜0.05)以及COX-2(P ＜0.001)的基因表达,不能下调IL-6的基因表达,但可以减少TNF-α (P＜0.001)及IL-6 (P ＜0.001)的释放.进一步的研究表明,不同剂量R7(25,50,100 μmol·L-1)均可显著抑制NF-κB转录活性(P＜0.05,P＜0.01及P＜0.001).研究表明,R7可以抑制LPS及TNF-α联合诱导炎症因子基因表达及分泌,其作用可能与其抑制NF-κB转录活性相关,提示其在神经炎症相关中枢神经系统疾病中可能的治疗作用.