非洲猪瘟病毒RPA等温检测方法的建立

• 作者: 刘立兵 孙晓霞 王建昌 王金凤 袁万哲
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 分子检测 等温扩增 聚合酶重组酶扩增 快速
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 技 术 支 撑
• 页码范围: 78-81,94
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65.9.1
• 字数: 3240字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2016.07.024

摘要

为建立一种简单、快速的非洲猪瘟病毒（ASFV）分子检测方法，基于ASFV P72基因保守序列，设计并合成引物，建立了一种ASFV重组酶聚合酶扩增（RPA）等温检测方法。结果表明，所建立的RPA方法在38℃水浴锅中恒温反应30 min，即可实现对目的片段的有效扩增；以包含ASFV P72基因的ORF质粒为模板， RPA的检测限达到102 copies，同世界动物卫生组织（OIE）推荐的实时荧光PCR方法检测限一致，但比OIE推荐方法的检测限高10倍；RPA仅特异性扩增ASFV P72基因，对FMDV、CSFV、PRRSV、PRV和PCV-2基因组cDNA或DNA没有扩增。本研究所建立的RPA方法操作简单、反应快速、检测成本低、结果确实可靠，为非洲猪瘟的一线防控提供了一种新的、可靠的技术支持。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁万哲	河北农业大学动物医学院	76	296	8.0	14.0
2	孙晓霞	河北出入境检验检疫局技术中心	18	137	7.0	11.0
3	王建昌	河北出入境检验检疫局技术中心	38	161	6.0	10.0
4	王金凤	河北出入境检验检疫局技术中心	25	113	5.0	9.0
5	刘立兵	河北出入境检验检疫局技术中心	9	65	4.0	8.0