蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白通路在七氟醚后处理保护心肌缺血再灌注中的作用

• 作者: 余鹏 周志东 周斌 张列亮 张静 朱晓红 袁林辉 陈勇
• 来源期刊: 中国循环杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 心肌缺血再灌注损伤 雷帕霉素靶蛋白 七氟醚
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 基础与实验研究
• 页码范围: 896-901
• 页数: 6页
• 分类号: R54
• 字数: 5548字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3614.2016.09.017

摘要

目的：探讨七氟醚后处理对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及蛋白激酶B（AKT）/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路在其中的作用。方法：取Langendorff离体灌注模型成功的大鼠心脏84个，随机分为7组（n=12）：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、七氟醚后处理组（SPC组）、NVP-BEZ235溶剂二甲基亚砜组（DMSO组）、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235组（BEZ组）、NVP-BEZ235＋七氟醚后处理组（BEZ＋SPC组）和单纯七氟醚给药组（SEVO组）。除Sham组和SEVO组，其余各组缺血30 min，再灌注120 min。SPC组、DMSO组和BEZ组分别于缺血末至再灌注初15 min给予经2.4%七氟醚、DMSO（<0.2%）和NVP-BEZ235（20μmol/L）饱和的K-H液灌注，随后更换为正常K-H液再灌注105 min。BEZ＋SPC组于缺血末至再灌注初15 min给予经2.4%七氟醚和NVP-BEZ235（20μmol/L）饱和的K-H液灌注。再灌注末观察各组心肌梗死范围，心肌组织病理学变化，检测蛋白[磷酸化AKT（phospho-AKT）/总的AKT（total-AKT）、磷酸化mTOR（phospho-mTOR）/总的mTOR（total-mTOR）、自噬相关基因6（Beclin1）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）/Bcl-2和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）]表达水平。结果：与I/R组比较，SPC组心肌梗死范围减少[（26.28±4.00）% vs （49.22±3.66）%]，心肌病理损伤减轻，phospho-AKT/total-AKT和phospho-mTOR/total-mTOR表达分别上调79.85%和67.02%，Beclin1、Bax/Bcl-2和cleaved Caspase-3表达分别下调33.77%、69.26%和48.84%（P 均<0.05）；与SPC组比较，BEZ＋SPC组心肌梗死范围增加[（53.85±4.06）%vs （26.28±4.00）%]，心肌病理损伤加重，phospho-AKT/total-AKT和phospho-mTOR/total-mTOR表达分别下调46.06%和42.95%，Beclin1、Bax/Bcl-2和cleaved Caspase-3表达分别上调29.90%、206.85%和114.65%（P 均<0.05）。结论：七氟醚后处理可通过激活AKT/mTOR通路，抑制心肌细胞自噬和凋亡，从而减轻离体大鼠心肌缺血再灌注损伤。