ASIC1a参与小鼠小脑普肯耶细胞发育的机制研究

• 作者: 卢祖能 尹皓 符辉 肖哲曼
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 普肯耶细胞 酸敏感离子通道1a 内质网应激 N-甲基-D-天冬氨酸受体
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 973-978
• 页数: 6页
• 分类号: R329.2
• 字数: 4955字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2016.10.001

摘要

目的 探讨ASIC1a参与小脑普肯耶细胞发育的机制. 方法 取C57BL/6初生小鼠,通过体外培养得到小脑普肯耶细胞.将原代小脑普肯耶细胞分为实验组和对照组,分别在细胞发育早期阶段及晚期阶段处理,其中实验组用shRNA-ASIC1a序列重组质粒慢病毒感染以下调ASIC1a表达,对照组用shRNA-对照序列重组质粒慢病毒感染.采用免疫荧光染色观察早期阶段和晚期阶段实验组、对照组小脑普肯耶细胞的形态学结构并计数树突分支;采用Westem blotting检测小脑普肯耶细胞中钙结合蛋白D-28K、胶质纤维酸性蛋白、Zic、小清蛋白以及N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)的表达;采用RT-PCR检测小脑普肯耶细胞中内质网应激相关因子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、蛋白激酶样内质网激酶(PERK)的表达. 结果 免疫荧光染色检测发现:在早期阶段和晚期阶段,实验组、对照组小脑普肯耶细胞形态学差异明显,对照组小脑普肯耶细胞的树突生长发育较实验组好;实验组小脑普肯耶细胞的二、三级树突分支数目较对照组明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blotting检测发现:在早期阶段,只有普肯野细胞特异性蛋白钙结合蛋白D-28K表达在实验组中较对照组明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).在早期阶段和晚期阶段,ASIC1a表达下调后,实验组NMDAR表达较对照组明显上调,差异均有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR检测结果发现:在早期阶段和晚期阶段,实验组内质网应激相关因子CHOP、PERK表达均较对照组明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 ASIC1a在小脑普肯耶细胞发育机制中发挥着重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢祖能	武汉大学人民医院神经内科	211	849	13.0	19.0
2	肖哲曼	武汉大学人民医院神经内科	48	104	4.0	7.0
3	符辉	武汉大学人民医院神经内科	8	17	3.0	4.0
4	尹皓	武汉市黄陂区人民医院神经内科	1	0	0.0	0.0