抗CD14单克隆抗体对脓毒症大鼠肺组织趋化因子和可溶性细胞间黏附因子-1表达的影响

• 作者: 付玉梅 侯林义 吕洁萍 姜琴 张文凯
• 来源期刊: 中华临床医师杂志（电子版）
• 关键词: 脓毒症 急性肺损伤 NR8383 抗CD14单克隆抗体 NF-κB(p65)
• 年，卷（期）: 2016,（21）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 3203-3209
• 页数: 7页
• 字数: 5300字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2016.21.013

摘要

目的 探讨抗CD14单克隆抗体(Anti-CD14McAb)治疗大鼠脓毒症急性肺损伤的保护机制.方法 在体部分:18只雄性Wistar大鼠(200~250 g)随机均分为3组,假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)和抗CD14治疗组(Anti-CD14组),CLP组和Anti-CD14组采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症急性肺损伤模型,Sham组作为对照组,开腹后只翻动盲肠,不进行结扎穿孔.Anti-CD14组术后经股静脉注射Anti-CD14McAb 0.2 ml(1μg/ml),Sham组、CLP组术后经股静脉注射等量生理盐水0.2 ml,6 h后经腹主动脉抽血,测定3组大鼠血浆中趋化因子(KC)和可溶性细胞间黏附因子-1(sICAM-1)表达水平,右肺下叶HE染色,观察肺组织病理结构的改变.离体部分:将培养的NR8383一部分接种于24孔培养板,分为3组,对照组(Ⅰ组)、脓毒症模型组(Ⅱ组)和Anti-CD14干预组(Ⅲ组).Ⅰ组加入正常血浆,Ⅱ组加入脓毒症血浆,Ⅲ组加入脓毒症血浆和Anti-CD14McAb共同干预,37℃、5%CO2培养箱孵育1 h,刮取NR8383,采用Western blot测定NR8383内NF-κB(p65)蛋白的表达水平;另一部分接种在预先放入适当大小灭菌消毒的盖玻片的24孔板上,分组及干预措施同上,采用激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)检测NR8383内NF-κB(p65)蛋白入核情况.结果 在体实验提示:(1)与Sham组[KC:(72.645±19.860)pg/ml;sICAM-1:(252.766±19.921)pg/ml]相比,CLP组血浆KC、sICAM-1水平[KC:(490.316±43.403)pg/ml;sICAM-1:(686.952±36.411)pg/ml]和Anti-CD14组血浆KC、sICAM-1水平[KC:(348.150±20.924)pg/ml;sICAM-1:(411.050±47.170)pg/ml]明显升高,而Anti-CD14组KC、sICAM-1水平明显低于CLP组,差异有统计学意义(P<0.05);肺组织病理结果 提示CLP组肺间质明显增厚、肺间质及肺泡腔内有大量炎症细胞浸润,Anti-CD14组症状较CLP组明显减轻,但较Sham组有所增加;细胞实验Western blot检测显示:Ⅱ组(2.1903±0.1199)和Ⅲ组(1.3658±0.1018)NR8383的NF-κB(p65)入核量高于Ⅰ组(1.0122±0.0780),Ⅲ组的NF-κB(p65)入核量低于Ⅱ组,差别有统计学意义(P<0.05).细胞实验CLSM检测结果 提示:与Ⅰ组(0.131±0.009)相比,Ⅱ组(0.685±0.037)和Ⅲ组(0.210±0.008)NR8383 NF-κB(p65)蛋白入核明显升高,而Ⅲ组NR8383 NF-κB(p65)蛋白入核低于Ⅱ组(0.685±0.037),差异有统计学意义(P<0.05).结论 Anti-CD14McAb在脓毒症急性肺损伤时可能调控肺泡巨噬细胞NF-κB(p65)蛋白入核,使其KC表达减少,进而减少中性粒细胞浸润,起到肺保护作用;同时Anti-CD14McAb能抑制内皮细胞表达sICAM-1,减少中性粒细胞对内皮细胞的黏附作用,起到肺保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张文凯	山西医科大学第二医院重症医学科	30	72	5.0	6.0
2	吕洁萍	山西医科大学第一医院麻醉科	44	269	9.0	14.0
3	侯林义	山西医科大学第二医院重症医学科	12	52	5.0	7.0
4	姜琴	山西医科大学第二医院重症医学科	7	53	5.0	7.0
5	付玉梅	山西医科大学第二医院重症医学科	2	10	2.0	2.0