短发夹RNA干扰CXCR4表达对卵巢癌SKOV3细胞凋亡及侵袭能力的影响

• 作者: 杨英捷 訾聃 赖靖
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢肿瘤 趋化因子受体4 RNA干扰 细胞凋亡 侵袭能力
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 653-659
• 页数: 7页
• 分类号: R711.75|R737.33
• 字数: 4836字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2016.06.008

摘要

目的:探讨短发夹RNA(shRNA)干扰趋化因子受体4(CXC R4)表达对卵巢癌细胞株SKOV3侵袭能力及细胞凋亡的影响.方法:将带有绿色荧光蛋白的慢病毒载体转染卵巢癌细胞株SKOV3,设计特异shRNA将其连入慢病毒载体;测序及荧光显微镜下观察绿色荧光验证慢病毒载体构建并转染,利用RT-qPCR检测转染后细胞株中CXCR4的mRNA表达,Western blot检测转染后细胞株中CXCR4、促凋亡蛋白Bax、B细胞白血病-2基因(Bcl-2)、Bcl-xl及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白表达;Annexin V/PE双染色流式细胞术检测SKOV3细胞凋亡率,Transwell小室检测转染后卵巢癌细胞株SKOV3的侵袭力.结果:测序结果及微下见绿色荧光蛋白表达,证实成功构建慢病毒载体并转染卵巢癌细胞株SKOV3,成功将特异shCXCR4连入载体;shCX-CR4组mRNA及蛋白表达水平明显低于NC组(P＜0.05);干扰细胞中CXCR4的表达能提高SKOV3细胞中Bax及Cleaved caspase-3蛋白的表达量,降低Bcl-xl与Bcl-2的蛋白表达,干扰后,SKOV3细胞凋亡率,shCXCR4组细胞凋亡率较CON组和NC组明显增高(P＜0.05);穿膜的细胞数明显减少,抑制率为58.94％,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:慢病毒干扰载体pLVshCXCR4-EGFP(2A)-Puro转染卵巢癌细胞株SKOV3,可以下调细胞株中CXCR4的表达,并能促进卵巢癌细胞的凋亡,并能有效地降低卵巢癌细胞的侵袭能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨英捷		37	80	5.0	6.0
2	訾聃		16	73	5.0	8.0
3	赖靖		1	3	1.0	1.0