miR-20a-5p通过调控细胞周期蛋白D1抑制肾小管上皮细胞增殖

• 作者: 公方晓 呼邦传 孙仁华 徐云祥
• 来源期刊: 中国现代医生
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞周期蛋白D1 细胞增殖 肾小管 微RNAs
• 年，卷（期）: 2016,（20）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R737.11
• 字数: 4435字
• 语种: 中文

摘要

目的 观察miR-20a-5p对肾小管上皮细胞增殖的影响,并验证其对细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)的靶向调控作用.方法 使用LipofectamineTM2000脂质体将微小RNA(miRNA)转染入人肾小管上皮细胞HK-2,实验分为3组,miR-20a-5p组转染miR-20a-5p,对照组转染阴性对照miRNA,空白组未做任何转染.CCK-8实验检测转染后各组细胞的吸光度值,流式细胞术检测各组的细胞周期变化.Western blot检测各组细胞cyclin D1的蛋白表达情况.构建荧光素酶报告基因,内含cyclin D1的3’端非翻译区(3'UTR),双荧光素酶报告基因实验验证miR-20a-5p对3'UTR的直接结合作用.结果 MiR-20a-5p组在转染后48～120 h的吸光度值均低于对照组和空白组(P＜0.05),另外两组差异无统计学意义(P＞0.05).转染后72 h,miR-20a-5p组处于G1期的比例为(63.89±3.61)％,高于另外两组(P＜0.05),而另外两组差异无统计学意义(P＞0.05).转染后48 h,miR-20a-5p组的cyclin D1蛋白表达减少(P＜0.05).与阴性对照miRNA相比,miR-20a-5p能抑制荧光素酶的活性(P＜0.05).结论 miR-20a-5p能抑制肾小管上皮细胞的增殖,并将细胞阻滞在G1期,其可能机制是miR-20a-5p抑制cyclin D1的表达,cyclin D1是miR-20a-5p的直接靶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙仁华	浙江省人民医院重症医学科	61	189	7.0	9.0
2	呼邦传	浙江省人民医院重症医学科	17	92	6.0	9.0
3	公方晓	浙江省人民医院重症医学科	4	5	1.0	2.0
4	徐云祥	浙江省人民医院重症医学科	1	1	1.0	1.0