miR -150促进鼻咽癌细胞增殖和侵袭的机制研究

• 作者: 张先锋 张志伟 肖娟 黄卫国 黄远见
• 来源期刊: 中国全科医学
• 关键词: 鼻咽肿瘤 miR-150 程序性细胞死亡因子4 细胞增殖 侵袭
• 年，卷（期）: 2016,（21）
• 所属期刊栏目: 论 著 Original Research
• 页码范围: 2513-2517
• 页数: 5页
• 分类号: R739.63
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2016.21.005

摘要

目的：探讨miR -150是否通过靶向调控程序性细胞死亡因子4（PDCD4）促进鼻咽癌细胞增殖和侵袭，进一步揭示miR -150在鼻咽癌中的癌基因作用。方法2014年3—6月，培养鼻咽癌细胞株 CNE -2，取生长良好的CNE -2用于实验。设计合成 PDCD4野生型引物序列以及突变型引物序列，连接到含有荧光素酶载体质粒上，检测荧光素酶活性。分别瞬时转染 Vector、pcDNA3.1（＋）- PDCD4、miR - ctr、miR -150 mimics 联合 pcDNA3.1（＋）-PDCD4于 CNE -2，48 h 后采用 Western blotting 法检测 PDCD4表达水平。分别瞬时转染 Vector、pcDNA3.1（＋）-PDCD4、miR -150 inhibitors、miR -150 mimics 联合 pcDNA3.1（＋）- PDCD4于 CNE -2，分别于培养24、48、72、96 h 后测定其吸光度（ OD）值，反映其增殖能力。分别瞬时转染 Vector、pcDNA3.1（＋）- PDCD4、miR -150 inhibitors、miR -150 mimics 联合 pcDNA3.1（＋）- PDCD4于 CNE -2，采用 Transwell 侵袭实验检测 CNE -2侵袭能力。结果无miR -150转染的 PDCD4野生型细胞株荧光素酶活性为（0.975±0.112），miR -150转染的 PDCD4野生型细胞株荧光素酶活性为（0.588±0.042），差异有统计学意义（t ＝7.853，P ＝0.018）。无miR -150转染的 PDCD4突变型细胞株荧光素酶活性为（0.992±0.135），miR -150转染的 PDCD4突变型细胞株荧光素酶活性为（0.875±0.095），差异无统计学意义（t ＝1.461，P ＝0.281）。转染 Vector、pcDNA3.1（＋）- PDCD4、miR - ctr、miR -150 mimics 联合 pcDNA3.1（＋）- PDCD4的 CNE -2 PDCD4表达水平分别为（0.655±0.058）、（1.147±0.152）、（0.704±0.068）、（0.313±0.036），差异有统计学意义（F ＝43.410，P ﹤0.001）；其中，转染 Vector、miR - ctr、miR -150 mimics 联合 pcDNA3.1（＋）- PDCD4的 CNE -2 PDCD4表达水平均低于转染 pcDNA3.1（＋）- PDCD4的 CNE -2，差异有统计学意义（P ﹤0.05）。转染物和时间对 CNE -2增殖能力存在交互作用，转染物和时间对 CNE -2增殖能力均存在主效应（ P ﹤0.001）。转染 Vector、pcDNA3.1（＋）- PDCD4、miR -150 inhibitors、miR -150 mimics 联合pcDNA3.1（＋）- PDCD4的 CNE -2穿膜细胞数分别为（56.6±7.5）、（26.5±3.7）、（30.5±4.7）、（55.2±6.9）个，差异有统计学意义（ F ＝18.550，P ＝0.014）；其中，转染 pcDNA3.1（＋）- PDCD4、miR -150 inhibitors 的CNE -2穿膜细胞数少于转染 Vector、miR -150 mimics 联合 pcDNA3.1（＋）- PDCD4的 CNE -2，差异有统计学意义（P ﹤0.05）。结论 miR -150通过抑制 PDCD4的表达，继而增强鼻咽癌细胞的增殖能力和侵袭能力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张先锋	南华大学附属第二医院耳鼻咽喉科	20	50	4.0	6.0
2	张志伟	南华大学肿瘤研究所	57	191	7.0	11.0
3	黄卫国	南华大学肿瘤研究所	27	160	7.0	11.0
4	肖娟	南华大学附属第二医院耳鼻咽喉科	24	72	4.0	8.0
5	黄远见	南华大学附属第二医院耳鼻咽喉科	18	29	3.0	4.0