Rab5a促进CpG诱导的巨噬细胞中炎性细胞因子和Ⅰ型干扰素的表达

• 作者: 刘欢 刘芳 孙晓琳 王岩 王玉珍 王雪 董仕超 谢基明 邹凯 陈俊娜
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Rab5a CpG TLR9 TNF-α IL-1β IFN-β
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 165-168
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1
• 字数: 2104字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2016.02.004

摘要

目的：采用稳定表达Rab5a及其显性负性突变体Rab5aN133I的巨噬细胞系RAW264.7，研究Rab5a及其突变体过表达后对 CpG 诱导的炎性细胞因子和Ⅰ型干扰素的表达的影响。方法：通过脂质体法将 Rab5a 及其突变体Rab5aN133I的真核表达载体转染到RAW264.7细胞中，用G418选择性培养基进行筛选，建立稳定表达Rab5a、Rab5aN133I的细胞系。通过RT-PCR、Real time-PCR和Western blot方法鉴定稳定表达的细胞系。用CpG刺激稳定表达Rab5a、Rab5aN133I的细胞系8 h后检测细胞因子TNF-α、IL-1β和IFN-β的表达量变化。结果：RAW264.7转染Rab5a真核表达载体后Rab5a的表达量显著高于对照质粒转染细胞（ P＜0.05）。 Rab5a过表达后，在CpG刺激作用下RAW264.7分泌的TNF-α、IL-1β显著升高（P＜0.01），IFN-β的分泌也显著升高（P＜0.05），而Rab5aN133I过表达后上述细胞因子的分泌均有所恢复。结论：Rab5a促进了 CpG诱导的巨噬细胞中炎性细胞因子和Ⅰ型干扰素的表达，Rab5a可能是TLR9信号通路的正向调控蛋白。