结核菌WhiB7,drrA,drrB基因表达与其抗结核药物的耐受关系研究

• 作者: 刘金录 刘镇 史建中 吕翠环 李海 王星 谢兰品 邱景富 陈向东 陈素丽
• 来源期刊: 临床肺科杂志
• 关键词: 利福平 异烟肼 WhIB7 drrA drrB
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2178-2182,2183
• 页数: 6页
• 字数: 3980字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-6663.2016.12.013

摘要

目的：探讨结核分枝杆菌耐药性与WhIB7,drrA,drrB基因表达的关系。方法通过设计并合成结核分枝杆菌的WhiB7,drrA,drrB基因引物,对耐药的结核分枝杆菌利用逆转录得到三个基因的cDNA。并对cDNA进行PCR扩增,通过优化PCR参数,使PCR方法达到检测cDNA拷贝数的准确性。分析WhIB7, drrA,drrB基因表达在不同类型耐药菌株的表达程度。使用药物刺激观察耐药菌株WhiB7,drrA,drrB基因的变化。结果逆转录荧光定量 PCR可以对 WhIB7,drrA,drrB基因很好的定量。对不同种耐药菌株进行WhIB7,drrA,drrB基因检测,阳性率分别为：单利福平耐药菌株85．0%(17/20)、35．0%(7/20)、30．0%(6/20),单异烟肼耐药菌株37．5%(12/32)、87．5%(28/32)、81．3%(26/32),利福平和异烟肼均耐药的菌株87．5%(14/16)、75．0%(12/16)、81．3%(13/16),含利福平异烟肼的多重耐药菌株88．2%(30/34)、82．4%(28/34)、85．3%(29/34),药物敏感菌株12．4%(12/97)、8．2%(8/97)、9．3%(9/97)。耐药菌株 WhIB7, drrA,drrB基因阳性率高于药物敏感菌株。 WhIB7基因与利福平耐药关系紧密,drrA和drrB基因与异烟肼耐药关系紧密。但不同的药物对耐药菌基因表达的诱导能力不同。结论 WhiB7,drrA,drrB基因的逆转录荧光定量PCR方法可以作为耐药结核分枝杆菌筛查的重要参考,为研究结核分枝杆菌日后基因表达与耐药机理研究奠定基础。