链球菌溶血素O的表达、纯化及生物活性鉴定

• 作者: 李富勇 梁海琦 肖士宾 陈鸿恩
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 关键词: 重组链球菌溶血素O抗原性 溶血活性 表达 纯化 生物活性
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 1556-1559
• 页数: 4页
• 字数: 3328字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.047

摘要

目的 重组表达链球菌溶血素O(SLO),纯化后验证其生物学活性.方法 合成目的基因,采用聚合酶链反应扩增、酶切连接的方式构建SLO-pET28a载体,经酶切和测序验证后,转化大肠杆菌BL21 (DE3)中,经诱导表达条件优化,采用镍亲和柱和分子筛纯化SLO.分别检测重组SLO和天然SLO对试剂盒校准品的响应情况和与临床样本匹配程度.结果 成功构建了SLO-pET28a-BL21 (DE3)菌株,在OD600=0.8时,25℃,0.4 mmol IPTG诱导,大于90％目的蛋白会可溶性表达.纯化后SLO纯度大于95％.重组的SLO与提取的SLO对试剂盒校准品的响应相当,与临床样本的匹配程度一致.结论 重组SLO的生物学活性与提取相当,为检测血清中的抗链球菌溶血素O奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈鸿恩		9	51	2.0	7.0
2	梁海琦		3	7	2.0	2.0
3	肖士宾		1	1	1.0	1.0
4	李富勇		1	1	1.0	1.0