一种新生SD大鼠皮质源性神经元的培养方法

• 作者: 李兴统 李力燕 杨金伟 王东艳 程敬茹 郭建辉 马微
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 皮质神经元 SD大鼠 细胞培养 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2016,（51）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 7672-7677
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 6871字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.51.011

摘要

背景：神经元的体外原代培养在研究神经系统的发育、再生、信号转导机制、神经药理学以及基因表达方面具有极其重要的地位。<br>　　目的：建立一种操作更加简单且能够得到较高纯度新生SD大鼠皮质神经元原代培养的方法。<br>　　方法：取1 d新生SD大鼠皮质。传统方法实验组：取整个皮质；改良方法实验组：取SD大鼠表面2.0-3.0 mm处皮质。木瓜蛋白酶消化后离心，制备成单细胞悬液，以1×105/孔的浓度接种至含神经元培养液的24孔培养板进行原代培养。培养3 d时采用免疫细胞化学染色方法，使用神经元特异性标志物Tuj1与MAP-2双标记法鉴定所培养的细胞；采用倒置相差显微镜观察6，24，48，72 h及5，7d细胞数和突起长度并记录。<br>　　结果与结论：①所培养的细胞可表达神经元特异性标志物Tuj1与MAP-2，因此所培养细胞为神经元，可用于之后实验；②实验组培养至第3天时神经元的纯度已达到峰值92%，而普通实验组神经元的纯度为51%；③2组细胞培养至6 h均已贴壁且长处小突起，培养至第3天时，细胞已初步形成神经网络，培养至5 d时神经网络密集；④研究所用方法简便能够稳定的培养出纯度较高的神经元，可以用于SD大鼠皮质源性神经元的相关实验研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李力燕	昆明医科大学神经科学研究所	23	19	3.0	3.0
2	程敬茹	昆明理工大学医学院	2	3	1.0	1.0
3	杨金伟	云南省第一人民医院普外二科	19	43	4.0	6.0
4	王东艳	昆明医科大学神经科学研究所	3	3	1.0	1.0
5	郭建辉	云南省第一人民医院普外二科	36	96	5.0	8.0
6	马微	昆明医科大学神经科学研究所	5	1	1.0	1.0
7	李兴统	昆明医科大学神经科学研究所	1	0	0.0	0.0